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GE-水中两虫(贾第鞭毛虫和隐孢子虫)检测新方法-操作流

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单
世界卫生组织及我国饮用水卫生标准(GB 5749-2006)均要求饮用水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫(统称两虫)含量不超过1个/10 L关于传统EPA 1623检测方法,水样的采集和浓缩中使用一次性滤囊,中间含复杂的洗脱程序,免疫磁珠分离回收率低,不仅样品处理的步骤繁杂和繁琐,系统误差过大,两虫回收率不到17%同时,这项实验还要求操作者具有丰富的经验,由于投入高和难度大,这种方法在行业的推广普及目前仍然阻力重重
GEYL生命科学部主张采用便携式真空加压膜过滤丙酮溶解密度梯度分离及免疫荧光检测相结合的方法,不仅提高两虫的回收率,简化实验步骤和提高流程效率,还能解决因费用昂贵而让两虫检测难以广泛普及的问题
那么,这种方法是如何做到的呢?简单说来,就是运用Whatman便携式加压真空过滤器(MD 142),运用真孔孔径的Nuclepore径迹蚀刻膜(1um)进行过滤富集和运用Percoll密度梯度介质离心分离,来大幅度提高两虫的回收率,所得分离产物经在GV050/2抽滤系统上运用Nuclepore径迹蚀刻膜表面回收并进行快速染色,Z终在荧光显微镜(或DeltaVision Elite高分辨率显微镜)下观察两虫形态和数量确切的说来,这个方法具有两大优势:一是Whatman便携式可换膜过滤器和真孔滤膜替代一次性滤器,二是密度梯度分离替代免疫磁珠分离法,在提高两虫回收率(~50%)的同时,大大降低了检测成本
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