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饲料中的氨基酸检测方法

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饲料中的氨基酸检测方法

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仪器及试剂

仪 器

1). 天平一台(精度0.1mg);

2). 恒温水浴锅一台;

3). 容量瓶;

4). 试管(1.5×15cm或1.5×10cm);

5). 微量进样器(5ul或10µl)一支;

6). 微量可调移液枪(1000ul)一支、吸头多个;

7). 旋涡混匀器一台;

8). HPLC系统及氨基酸分析专用柱(4.6×250mm);

试剂

1). 超纯水(≥18MΩ∙cm);

2). 乙腈(HPLC级);

3). 三水合醋酸钠(分析纯);

4). 冰醋酸(分析纯);

5). 衍生试剂A和衍生试剂B溶液,至于冰箱保存(衍生试剂包对身体有害,用时请做好防护措施);

6). 正己烷(HPLC级)。

二、样品制备

准确称取饲料10-50 mg,置于25 ml塞比色管中,加1.0 mol/L盐酸10 ml搅拌提取15 min,静置10分钟,将上清液过滤到100 ml量瓶中,残渣加1.0 mol/L盐酸10 ml搅拌3 min,重复提取两次,合并上清液,收集滤液并加1.0 mol/L盐酸定容至刻度,摇匀。

三、流动相的配制

流动相A: 0.1mol/L醋酸钠溶液(pH 6.5):乙睛=93:7

配制方法:准确称取三水合醋酸钠13.6g于1000ml水中,搅拌均匀,使之溶解,用冰醋酸或氢氧化钠溶液调pH值至6.5;准确量取配制好的三水合醋酸钠溶液465ml和乙腈35ml,混合均匀,抽滤过0.45µm滤膜;  

流动相B:水:乙腈=20:80

配制方法:准确量取水100ml和乙腈400ml,混合均匀,抽滤过0.45µm滤膜;

饲料中氨基酸测定.jpg

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