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牛肉片中(饲料)的粗蛋白含量检测方案

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【概述】

凯氏法测定样品中的含氮量,即在催化剂作用下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。

【实验/操作方法】


1.样品的消化

称取样品0.5~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入消化管中,加入5g混合催化剂,与样品混合均匀,再加入10ml硫酸,将消化管置于消化炉上加热,直至呈透明的蓝绿色,然后在继续加热,至少30分钟。

2.SKD-20S2消化炉 

操作(6个样品和2个空白)

按”SET”键+“A/M”键3秒,跳出第二设置区程序参数修改界面。连续按“SET”键数次出来

检查“RUN”=“3”,pro= “ 1 ”  ,再设置r1 =200,T1=5分钟,c1=180度,r2=180,T2=10,C2=250度,r3=180, T3=5, C3=350度,r4=200,T4=90,c4=410,r5=0,T5=0,C5=0度。。。。r32=0,t32=0,c32=0,设置好后等几秒钟,程序会自动保存。

再打开启动开关(绿开关)-----------程序自动运行,自动结束。如果出现不运行,再检查“RUN”设置为“3”,pro= “ 1 ”  。

3.SKD-1000全自动定氮仪

样品消化好后,冷却至室温。

蒸馏设置:碱45ml,稀释液40ml,标准酸0.0911(mo/l),蒸馏功率一百%,蒸馏时间6分钟,硼酸仪器自动加。

【实验结果/结论】

氮含量计算公式

重复性计算公式

【仪器/耗材清单】

耗材


1)硫酸:化学纯,含量为98%,无氮。

2)混合催化剂:1g硫酸铜,9g硫酸钾,均为化学纯,磨碎混匀。

3)氢氧化钠:化学纯,40%水溶液(m/v)。5%水溶液(m/v)

4)硼酸:化学纯,2%水溶液(m/v)。

5)混合指示剂:甲基红0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为三个月。

6)盐酸标准溶液:c(HC1)=0.1mol/L。9ml盐酸(分析纯),注入1000ml蒸馏水中。

7)硼酸吸收液:2%硼酸溶液(20 g/L):称取100 g 硼酸,加水溶解后并稀释至5000 mL。加入(1:3.5混合指示剂6ML)摇匀,再加入5%的氢氧化钠稀释溶液0.35ML摇匀,颜色呈紫红色。

仪器

1)实验室用样品粉碎剂或研钵

2)分析天平:感量0.0001g

3)消化炉(SKD-20S2)

4)容量瓶100ml

5)滴定管:10、25ml

6)消化管:300ml

7)定氮仪(SKD-1000)



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