1. 提取: 将样品充分均质,准确称取2.0g样品,加入20ml提取剂*,混匀;超声提取10min,6000r/min离心3min,收集上清液。将提取剂减半,按以上步骤重复提取两遍,合并上清液;将上清液于45℃、真空度-0.96Mpa的条件下旋转蒸发至2ml,再加入80ul甲酸,混匀,作为待净化液。 提取剂*:氨水+70%乙醇(1+99,体积比) 2.SPE净化:(PLS,500mg/6ml)(Cat.#68005) 活化:依次5ml甲醇、5ml水,弃去流出液; 上样:将待净化液加入至小柱中,弃去流出液; 淋洗:加入4ml 水,弃去流出液,将SPE柱抽干; 洗脱:加入6ml 2%氨水-甲醇溶液,收集流出液,在45℃下氮吹至约0.5ml,用水定容至1ml,混匀,作为待测液。
色谱条件: 色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6mm,5.0um(Cat.#99603) 进样量:20uL 流速:1.0mL/min 柱温:35℃ 检测波长:254nm 流动相A:0.05mol/L乙酸铵 流动相B:乙腈
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