尿液中对硝基酚的测定 HPLC法--ProElut Al-N+ProElut PXL+Diamonsil C18（2）

提取

(1) 取10 g样品，加入2 mL浓盐酸，沸水浴60 min，冷却至室温；

(2) 加入25 mL乙酸乙酯振荡2 min，6000rpm离心2 min；

(3) 取出上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至近干，再加入3 mL50%甲醇水混匀，待净化。

净化

ProElut Al-N（1 g/6 mL）（Cat.#：65306）上层 ProElut PXL 3 mL（Cat.#：65920）下层

a活 化： 加入5 mL甲醇、5mL50%甲醇水，流出液弃去；

b上 样： 将待净化液加入小柱，流出液弃去；

c淋 洗： 加入5 mL50%甲醇水淋洗小柱，流出液弃去，弃去上层小柱，再用3 mL50%甲醇水淋洗下层小柱，流出液弃去；

d洗 脱： 加入3mL甲醇，收集洗脱液；

e重新溶解： 将洗脱液在40 ℃下减压蒸至近干，1 mL水溶解残渣，过微孔滤膜供HPLC分析。

色谱柱：Diamonsil C18（2），250 mm×4.6 mm，5 μm（Cat.#99603）

流 速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱 温：30 ℃

检测器：UV 360 nm

流动相： A：0.1%甲酸水 B：甲醇 A：B=60：40

本方案适用于尿液中对硝基酚的检测，本方法定量限0.1mg/kg。