1. 样品准备/提取 1、称取0.2 g蛋样品,加入20 mL温水,充分溶解;
2、将样品溶液超声提取5 min;
3、超声后,加入0.5 mL60%HClO4,振荡2 min;
4、8000rpm,离心5 min,取出10 mL上清液,待净化。 2. SPE柱净化——ProElut PLS 150 mg/6 mL(Cat.#68004) (1)活 化:6 mL甲醇,6 mL水活化; (2)上 样:加入待净化液,弃去流出液; (3)淋 洗:加入6 mL0.01mol/L HCl溶液,弃去流出液; (4)洗 脱:加入6 mL甲醇,收集流出液,55 ℃减压蒸干,用0.5%氨水溶液定容至1 mL,供HPLC检测。
HPLC分析条件 色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm ID,5 μm (Cat.#99603)
流动相:A : B=:92:8 A:0.05 mol/LKH2PO4(用KOH调节pH6.3) B:甲醇 流 速:1.0 mL/min
检测器:UV 280
柱 温:30 ℃
进样量:20 μL
本方法适用于蛋中叶酸的检测。
叶酸
方法: SPE/HPLC 基质:
分析条件: 波长:275nm 流速:1.0ml/min 流动相:甲醇:缓冲液=150:850 缓冲液:5
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