GX液相色谱仪

GX液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。GX液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。

GX液相色谱法有“四高一广”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③GX：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到Z佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用GX液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

⑥柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物

⑦样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

此外GX液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。GX液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。GX液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。

GX液相色谱仪工作原理

GX液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

液相色谱分类

一.液固吸附色谱

1.1分离原理 液固色谱是基于各组分吸附能力的差异进行混合物分离的，其固定相是固体吸附剂。

1.2固定相 吸附色谱固定相可以分为极性和非极性两大类。

1.3流动相 流动相要求：

1.3.1选用的溶剂应当与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性

1.3.2选用的溶剂应有高纯度，以防所含微量杂质在柱中积累，引起柱性能的改变。

1.3.3选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配，如果使用紫外吸收检测器，就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂；若使用示差折光检测器，就不能用梯度洗脱。

1.3.4选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力，以提高测定的灵敏度。

1.3.5选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。

1.3.6应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂，以保证工作人员的安全

1.4应用 液固色谱是以表面吸附性能力为依据的，所以它常用于分离极性不同低的化合物，也能分离那些具有相同极性基团，但数量不同的样品。

二.液液分配色谱

1.1分离原理 分配色谱法的原理与液液萃取相同，都是分配定律。

1.2固定相 分配色谱固定相由两部分组成，一部分是惰性载体，另一部分是涂渍在惰性载体上的固定液。

1.3流动相 分内色谱中，要求流动相尽可能不与固定液互溶

1.4应用 既能分离极性化合物，又能分离非极性化合物。由于不同极性键合固定相的出现，分离的选择性可得到很好的控制。

三.键合相色谱

1.1分离原理 1.1.1正键合相色谱分离远离：使用的是极性键和固定性，溶质在此类固定相上的分离机理属于分配色谱.1.1.2反键合相色谱分离原理：使用的是极性较小的键合固定相，其分离机理可用疏溶剂作用理论来解释。

1.2固定相 按极性大小可分为非极性、弱极性、极性化学键合固定相三种。

1.3流动相 1.3.1正键合相色谱中，采用和反相液液分配色谱相似的流动相，流动相的主体成分为己烷或庚烷。

1.3.2反相键合相色谱中，流动相采用和反相液液分配色谱相似的流动相，主题为水。

1.4应用 

1.4.1正键合相色谱法的应用：多用于分离各类极性化合物如染料、、多巴胺、氨基酸等；1.4.2反键合相色谱法的应用：由于操作简单，稳定性和重复性好，该方法已成为一种通用型液相色谱分析方法。在生物化学、医药研究、食品分析和环境污染分析等多个领域有了很大的应用和发展。

四.凝胶色谱

凝胶色谱又称分子排阻色谱，它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。凝胶色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料，有一定的形状和稳定性。根据所用流动相的不同，凝胶色谱法可以分为两类：即用水溶剂做流动相的凝胶过滤色谱法（GFC)与用有机溶剂如四氢呋喃做流动相的凝胶渗透色谱法（GPC).

GX液相色谱仪的系统组成

GX液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置（用双泵）、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。与经典液相柱色谱装置比较 GX液相色谱，具有GX、快速、灵敏等特点，GX液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。与经典的液相色谱相比，具有GX液相所用的固定相粒度小（５ｕｍ-１０ｕｍ）、传质快、柱效高的优势。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有８０％的有机化合物可以用ＨＰＬＣ来分析测定。

GX液相色谱仪应用范围

1.环境分析中的应用

         可应用于环芳烃、农药 残留分析等。

2.食品分析中的应用

        可应用于食品营养成分分析、食品添加剂分析、食品污染物分析等。

3.生命科学中的应用

        可在分子水平上研究生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学及生化领域的分子量物质纯化、分离和测定等。

4.医学检验中的应用

       体液中代谢物测定、药代动力学研究、临床药物监测等的分析测定。

5.无机分析中的应用

      阴、阳离子的分析等。