细胞分析仪

　　细胞分析仪又叫流式细胞仪，是以流式细胞术为核心技术，集光学、电子学、流体力学、细胞化学、生物学、免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术于一体的先进科学技术设备。

细胞分析仪的原理

　　细胞分析仪主要用作细胞分析和细胞分选。

　　细胞分析原理：

　　将待测样品制成单细胞悬液，经特异性荧光染料染色后装入样品管，由系统产生一定气体压力将样品管送入流动室，细胞悬液从样品管射出，样品管周围由鞘液包围。

　　鞘液管与样品管成一定角度使得待测细胞在鞘液的作用下成单行排列，形成细胞柱，通过喷嘴与入射的激光束垂直相交，细胞或颗粒被激光激发产生荧光信号和非荧光散射信号，Z终通过光学系统和检测系统处理后由计算机输出。

　　由于各细胞或颗粒的大小、内部结构、理化性质、蛋白质含量、核酸(DNA或RNA)含量等的不同，使得接收到的荧光信号和非荧光散射信号也不同，从而实现对不同性质的细胞或群体进行分析和分类。

　　细胞分选原理：

　　细胞分析仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。在分选过程中，细胞分析仪通过高频振荡对液流施加液滴驱动能量，使其断离为均匀的液滴，根据事先确定的分选标准由系统判断是否将被分选，由充电电路对选定的细胞液滴进行充电。

　　当带电液滴通过电场时，会在电场的作用下向左或向右偏转，具体方向取决于液滴的电荷极性，未带电荷的液滴不受电场的影响，它们将在ZX位置通过，Z后进入废液抽吸器，发生偏转的液滴落入相应的收集器中，从而实现细胞分选。

　　一般来说，在进行较大或者脆弱细胞的分选时，为了得到Z佳结果，应该使用较大的喷嘴和较低的压力;在分选较小或者非脆弱细胞时，如果要增加产量，应该使用较小的喷嘴和较高的压力。

细胞分析仪的特点

　　细胞分析仪可以对不同的单细胞悬液进行检测，而且在确保细胞数量足够的前提下，可以在短时间内获取大量的细胞，可以同时检测数百万的细胞。

　　细胞分析仪可以对单个细胞的多种特征进行分析，对单个细胞的不同的参数进行分析，借助荧光染色的方式对单细胞受体的表达方式和DNA的含量等进行分析，实现了定量分析和定性分析的结合。

细胞分析仪性能的技术指标

　　细胞分析仪性能的技术指标主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、分析参数多少及分析、分选速度及纯度等。

　　荧光分辨率是指分辨两个相邻峰的Z小距离，通常用变异系数(CV值)来表示。现在市场上主流型号的荧光分辨率小于2.0%，有的甚至在1%之内。

　　荧光灵敏度反映了仪器探测Z小荧光光强的能力，一般用荧光微球上可测出的荧光(FITC)的Z小分子数来表示。目前细胞分析仪可以达到100以内。一般分析速度为500-10000个细胞/s，分选速度控制在1000个细胞/s以下，分选纯度>98%，有的细胞分析仪分析速度可达100000个细胞/s，分选速度可达70000个细胞/s，分选纯度>98%。

　　应用方向不同，分析参数的多少差异较大，少的可以分析3个荧光参数和1个散射信号，多的可以分析13个荧光参数和3个散射信号。

细胞分析仪的用途

　　1、在临床上的用途

　　细胞癌变过程中伴随细胞DNA含量的改变，DNA非整倍体细胞是恶性肿瘤的特异性标志。

　　细胞分析仪的FSC能够给出这些信息，在肿瘤的早期诊断和鉴别诊断中有着很重要的作用;早在80年代人们发现特定T细胞亚群可以反映AIDS患者的临床状态，而细胞分析仪可以对这些T细胞亚群进行检测，为AIDS的诊断、ZL提供有用信息。

　　细胞分析仪借助于各种荧光染料测定一个细胞的多种参数完成白血病及淋巴瘤的诊断，准确率达90%左右，较传统形态学检查准确性提高10%~20%。细胞分析仪对淋巴细胞及其亚群数量的检测，可以探索疾病的发病机理、病程、预后，指导临床ZL方案。

　　2、在生物学及微生物学上的用途

　　从早期到现在，在细胞及细胞器方面很多已被人们所接受的科技，都经细胞分析仪研究过。在细胞功能的早期研究中，研究者仅能通过观测微生物的吞噬来研究噬中性粒子，而细胞分析仪可以通过它们的大小、形状、抗体及吞噬过程中微生物种类、数量的变化更深入的辨别、研究这些噬中性粒子;氧自由基的实时、单细胞繁殖评价，DNA倍体分析，细胞循环中细胞增殖和凋亡分析等都会用到细胞分析仪;细胞分析仪对细胞周期可以轻松分析，促进了以此为基础的植物学的发展，辅以成像仪器，细胞分析仪可以对微生物的成长、繁殖进行3-D研究。

　　3、在生殖学及制药学上的用途

　　利用对精子DNA进行无害标定的DNA染料或H-Y抗体都可以对精子进行检测和分类，完成生殖学上的要求;细胞分析仪检测肿瘤细胞的耐药相关蛋白的表达水平，对检测临床肿瘤化LX果及药物的选择有一定的意义。

　　此外，细胞分析仪在细胞毒，可溶性蛋白质分子，钙离子浓度检测等都有很广泛的用途。