微生物鉴定系统的工作原理

　　微生物鉴定系统近年来得到了快速发展，可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前微生物鉴定系统已在世界范围内临床实验室中广泛应用。

微生物鉴定系统的工作原理

　　目前微生物鉴定系统从原理上包括以下几种：

　　1、基于表型的鉴定方法：如Microstation和Omnilog自动微生物鉴定系统，基于95种碳源或化学敏感物质的利用为原理，可鉴定细菌、酵母和霉菌超过2650种;另外还有基于脂肪酸鉴定的方法，采用气相色谱分析微生物细胞壁的脂肪酸构成;在临床领域，梅里埃、BD、热电和西门子都有相应的自动微生物鉴定系统，其数据库主要以鉴定致病菌为主，通常是200-600种数据库，可做药敏测试;

　　2、基于基因型的鉴定方法：如基因测序法及基因条带图谱法。

　　3、基于蛋白的鉴定方法：以布鲁克和梅里埃为代表，基于蛋白质飞行质谱平台，分析不同高度保守的微生物核糖体蛋白电解离后的电子飞行时间进行鉴定。

　　三类方法各有优缺点，理论上不冲突，应该互为补充，应根据需要进行选择。

微生物鉴定和药敏试验分析系统

　　微生物鉴定和药敏试验分析系统在临床微生物实验室的应用，为微生物检验工作者对病原菌的快速诊断和药敏试验提供了有力工具。

　　微生物鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础，而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。大多微生物鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化，色原性或荧光原性底物的酶解，测定挥发或不挥发酸，或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。

　　药敏试验分析系统的基本原理是将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，通过测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。在含有抗生素的培养基中，浊度的增加提示细菌生长，根据判断标准解释敏感或耐药。

常见的微生物鉴定系统

　　1、VITEK-ATB半自动细菌鉴定和药敏分析系统

　　VITEK-ATB是生物-梅里埃公司产品，由计算机和读数器两部分组成，计算机程序包括ATB和API的鉴定数据库、ATB的药敏数据库、数据储存和分析系统及药敏专家系统。微生物鉴定和药敏反应板在机外孵育后，一次性上机读取结果，由计算机进行分析和处理，并报告细菌鉴定和药敏结果。

　　2、AutoScan-4半自动细菌鉴定和药敏分析系统

　　AutoScan-4由计算机和读数器两部分组成。微生物鉴定和药敏反应板在机外孵育后，一次性上机，自动判读鉴定和药敏试验结果;亦可人工进行判读，将编码输入计算机，由计算机软件评定结果。有微生物鉴定及鉴定药敏复合板两种测试卡。

　　3、BBLTM CrystalTM半自动细菌鉴定系统

　　BBLTM CrystalTM半自动细菌鉴定系统是BD公司产品，将传统的酶、底物生化呈色反应与先进的荧光增强显色技术结合以设计鉴定反应Z佳组合。反应板在机外孵育后，上机自动判读鉴定结果。配套提供独立分装的鉴定用肉汤试管，确保无菌状态，使用方便。配套比浊仪可快速调配所需浊度的菌液。

　　4、AutoReader半自动细菌鉴定和药敏分析系统

　　AutoReader半自动细菌鉴定和药敏分析系统由计算机和读数仪等组成。采用荧光测定法，反应板在机外作定时孵育后，上机读数，由SAMS软件评定测定结果，也可通过SAMS系统人工确认法输入计算，或完全由人工输入作评定。所用鉴定板和药敏板与全自动机型中的反应板是一样的。

　　5、YJ圈直径测量仪

　　YJ圈直径测量仪已在临床应用。经孵育后的药敏平板，被仪器的图象分析系统识别并计算YJ圈直径。根据判断标准，报告药敏试验结果。这些仪器可减少人工测量YJ圈直径大小差异及主观判断错误。