微生物鉴定技术

　　微生物鉴定结果受很多因素的影响，如微生物可能分布的不均匀性、产品的YJ性和KJ性等。因此，在生产中，为保证鉴定结果的可靠性，必须按照相关的方法进行严格的方法验证，按照验证后的鉴定方法进行微生物鉴定。

微生物鉴定技术应用的意义

　　近年来药品不安全事故不断发生，并呈上升趋势。在药品质量事故的高发期，强化药品微生物鉴定工作显得尤为重要，尤其是无菌药品。

　　在无菌药品的生产中，对原料、辅料、包装材料、生产场所、生产过程的微生物控制是保证药品质量的基础，所以利用微生物鉴定技术快速、准确地获得鉴定结果，对当前无菌药品微生物鉴定工作来说非常重要。

微生物鉴定技术的具体应用

　　1、PCR技术的应用

　　PCR技术采用体外酶促反应合成特异性DNA片段，再通过扩增产物，使DNA急剧增长，数量可达其原来的百倍，然后检测荧光条带，借此准确确定微生物的种类。

　　PCR技术具有很高的灵敏度，从理论上来说，在检测细菌过程中，通过这种技术可检出一个细菌的拷贝基因，从而在较短的时间内增菌或者是不增菌，在细菌检测中能大大节省时间，且此种技术能定量检测肉毒杆菌、沙门杆菌以及大肠杆菌等，大大扩大了检测的范围。

　　PCR技术能够鉴定出药品中含有ZL大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及李斯特杆菌多种成分，相关专家学者在还没有经过富集化培养就采用免疫磁珠并结合PCR技术，准确并快速对药品进行检测，确定了药品中含有李斯特菌和大肠埃希氏菌成分;还有有关专家采用实时荧光定量PCR技术检测实验菌株，确定药品中多数菌株呈阴性，而有少量溶血弧菌呈阳性。

　　不过，这种微生物鉴定技术还存在一定不足，比如由于增菌培养基或者其他微生物DNA会对水生栖热菌具有一定YZ作用，进而造成检验呈假阴性，对结果造成一定影响。

　　2、基因芯片技术的应用

　　基因芯片技术指的是通过微电子技术和微加工技术，将海量的基因寡核苷酸进行高密度且有序排列，使其排列在纤维膜和硅片等载体上，从而形成信息检测芯片。

　　采用基因芯片技术对检测样品DNA经过PCR技术扩增后制备的探针点样在基因芯片的表面，经过荧光标记的寡核苷酸点和芯片表面的探针进行杂交，然后使用扫描仪对芯片上的荧光分布进行分析，从而确定样品微生物DNA中是否有某些特定的微生物。基因芯片检测技术还可在寡核苷酸的探针中添加相应探针，借此在一定程度上扩大检测范围，同时通过添加并调整探针使基因芯片检测的准确性得以大大提升。

　　从理论上来说，利用基因芯片技术可在一次试验中有限检测出全部潜在致病原，或者在一张基因芯片中检出一种治病原的遗传学指标，使基因芯片技术检测的速度、灵敏度以及便捷性等得到大大提升，解决传统操作的自动化程度低、效率低以及操作复杂等问题。

　　3、基因探针检测技术的应用

　　基因探针检测技术是针对已标记的核苷酸序列通过生物素、同位素等进行检测。基因探针检测技术的检测原理为：通过分子杂交并结合目的基因方式，运用其所产生的信号探测出目的基因。

　　探针标记有非同位素和同为素两种，探针标记后的特异性较强，且能提升病原性微生物的检测速度，然而，由于检查过程中标记的同位素会造成放射性污染，所以，在实验时需添加安全性防护措施，避免对机体产生一定危害。

　　4、洁净区微生物数据库的应用

　　对于无菌药品生产来说，生产区域的微生物种类非常有限，更具无菌药品的具体生产内容和过程，洁净区内会有芽孢杆菌占绝大多数酵母菌、霉菌和葡萄球菌少量存在，放射根瘤菌、苛养颗粒链菌等少数微生物种类。

　　在无菌药品生产过程中，应初步建立微生物数据库，建立洁净区微生物数据库是追溯洁净区微生物污染来源的有效方法，有效指导并控制无菌药品生产中的污染问题。同时，为防止微生物污染，通过微生物数据库并结合一些常规方管理法，比如对污染源及其途径进行了解，并进行微生物限度检查，控制药品质量。注意在洁净区的人员数量应控制好，并要求人员具有自我约束的意识等，从而有效控制洁净区微生物。

　　在生产中应用微生物鉴定技术和检测设备向微型化以及多功能化方向发展，更具有较快的检测速度以及更为极ng准的鉴定结果。