生化分析仪检定规程

　　生化分析仪又叫生化仪，是以分光光度法为基础发展起来的，是通过分析患者的血液和体液从而帮助医生诊断疾病的仪器。生化分析仪需要检定的方面有很多，无论是哪方面都要按照一定的测量标准和技术要求来进行。

生化分析仪检定内容

　　1、重复性检定

　　生化分析仪重复性检定是以正确操作为前提，在程序、检定员、仪器、环境等条件相同的情况下，对短时间内重复检定所得出结果的一致性进行分析，体现生化分析仪的精度、稳定性。结论越符合要求，表明生化分析仪的精度越高、稳定性越强。如出现重复性超差，首先要排除以下情况：

　　①温度：室内温度偏高会影响生化分析仪散热，仪器内部温度的持续升高将导致重复性降低。

　　②湿度：湿度偏高不仅会腐蚀、氧化零件，而且会使滤光片表面发霉、发雾，影响透光率。

　　③电压：电压不稳定，会干扰到光源发光器、微电流放大器和前置放大器等组件的运行。

　　④防尘：灰尘不仅会降低生化分析仪绝缘性能，而且阻碍组件之间接触。

　　以上几点是造成生化分析仪重复性超差的不稳定因素。

　　2、准确度检定

　　生化分析仪准确度是指检测值与真值之间一致的程度。生化分析仪能否给出被检测样本正确的结论，准确度是重要的技术指标。生化分析仪属于高精密仪器，检测过程中诸多环节都可能影响到准确度的示值误差。误差受到以下因素影响：

　　①参数设定：通常不允许在检定时修改生化分析仪参数，因为参数变动或可能影响日后的检验工作，故需有可行方法解决此问题。其中计算因子K值的设定，直接影响到检测结果。在检测酶类时，参数不能随意改动，K值即随之不变。由于摩尔吸光系数ε值受许多因素影响，所以实际ε值和理论ε值可能存在差异，相应的实测K值和理论K值也存在差异，酶类检定结果超差就不可避免，需通过检查和校准理论K值减少这种误差。

　　②加注系统：由于生化分析仪使用率高，试剂针长期被使用易受腐蚀，加注系统的准确度随之降低，检定误差相应增大。这就要求在检定工作中对加注系统也进行检测，把Z终检定结果误差降到Zdi。

　　③反应运行系统：准确度误差主要产生于反应运行系统中反应盘上装载的比色杯，长时间使用可能出现清洁不净或表面磨损的情况，进而对摩尔吸光系数产生影响，增大了生化分析仪准确度误差。所以检定过程中要注意查看比色杯，污损严重的，需更换后再行检定。

　　3、杂散光检定

　　杂散光是指远离吸收光的其他波长的入射光。它会使比尔定律出现偏移，光谱测量绝大部分误差均来源于此。实际检定中，产生杂散光误差的原因有：

　　①光学元件被灰尘附着。

　　②光学系统没有做好遮蔽，室内光线直接进入生化分析仪。

　　③热辐射或荧光引起的二次电子发射等等。因此，要非常重视这些问题，以降低其对吸光度测定法准确性的影响。

　　4、线性检定

　　在实际检定时，主要表现为吸光度测定值与浓度之问不成线性关系，出现偏离的现象。波长、杂光、带宽、辐射光的非平行性、比色杯误差以及检测器噪声等都会影响线性误差，导致该项结果不合格。

　　5、交叉污染检定

　　在日常检定过程中，试剂间相互污染，直接影响了检定结果的准确性，所以在检定前应进行预冲洗或者增加冲洗次数。同时检定人员应合理地设置检定项目顺序，把非干扰项目穿插在其他项目之间，以便得到更准确的数据。但仅依靠设置项目顺序，无法根除试剂间的交叉污染，这就需要工作人员对生化分析仪进行及时维护，尤其要定期清洗保养好搅拌棒、样品针、试剂针、比色杯，以确保设备正常运行。

生化分析仪检定方法

　　生化分析仪要检定的项目有很多，每种项目的测量溶液标准都是不一样的，所以需要的溶液在种类和浓度上也是不同的，需要使用的标准溶液主要的化学成分分别是：亚硝酸钠、氯化钴以及氧化钛等，这些溶液在对应的检定项目中应用效果很显著。

　　1、波长方面检定方法

　　主要检定波长的准确度与重复性，需要检定的对象有两种：

　　①分光式生化分析仪波长，在对其准确度和重复性进行测定时，先要确定波长标准值，可以作为参考的对象有很多，比如汞灯、氧化钬标准溶液或标准干涉滤光片，在选择时，波长在分布上要保持均匀，在数量上也要使其有参考价值，一般选择三条。选择单方向测量，每条波长的测量数值要有三个，以便计算出平均值，平均值与波长准确度有关，后者和其相差一个波长标准值。波长准确度计算公式为：

　　λi为波长每次的测量值，在这i分别为1，2，3。在这三个测量值中找到Zda值和Z小值，然后求差，Z后计算的数值就是波长重复性。

　　②滤光式生化分析仪的ZX波长，主要检定误差和带宽，在该检定中，主要使用分光光度计，要将波长准确度控制在1nm之内，该设备针对滤光片，直接反映的信息为波长与透射比光谱特性曲线。横轴为波长，纵轴为透射比。

　　通过曲线数值，可以将其用在滤光波片ZX波长计算中，求得滤光片不同透射率下的ZX波长，就可以将其ZX误差计算出来。

　　ZX波长计算公式表达为：λ₀=(λ₁+λ₂)/2。

　　ZX波长误差和ZX波长就差一个标准波长，将λ_t作为标准情况下的波长，则ZX波长误差∆λ计算公式为：∆λ=λ₀-λ_t。

　　当透射比为T_max/2时，对应波长之间的距离就是滤光片的带宽。

　　2、吸光度方面检定方法

　　在检定时，需要先准备好参比液和标准物质以及相关仪器，测定对象为吸光度，所以还要使标准物质的吸光度不同，可以分别为0.和1.0A，对相关仪器的性能进行检验，主要看零点和1**%时的透射比是否符合检定要求。检定过程就是在测定波长实际吸光度值后，与相应标准值作比较，Z后查看两者之差是否在吸光度的参考范围内。

　　3、线性误差检定方法

　　生化分析仪线性误差和吸光度有关，所以还要对吸光度进行计算，将不同浓度的氯化钴标准溶液作为测定对象，将测定条件定位波长为510nm，所以在对线性误差进行检定之前，还要准备好相关的溶液和参比液，溶液的浓度Z小为2.0g/L，参比液选蒸馏水。吸光度的测量次数定为3次，计算出这三组数据的平均单位值，相关的计算公式为：

　　A为吸光度值，C为标准溶液的浓度值。

　　线性标准差就是任何一次实测吸光度值和平均单位吸光度值之间的差值与平均单位吸光度值之比。用符号∆’表示线性误差，相关的公式为：

　　将不同浓度下的溶液吸光度实测数值与平均单位吸光度值记录下来，并做好计算。关于线性误差方面的测定值方面，不同吸光度范围以及不同级别的生化分析仪对线性误差要求不同。如下表所示。

　　4、交叉污染检定方法

　　在检定之前，对标准溶液和波长进行选定，前者可选择浓度Z小和Zda时的溶液，后者选择510nm波长。将前者置于后者条件下进行交叉污染检定。

　　在测定过程中，将两种溶液的Z小样品量准备出来，将Z小浓度2.0g/L的标准溶液作为吸收池冲洗试剂，冲洗次数定为3次，然后就可以对Z小浓度和Zda浓度时的标准溶液进行测定，将测定次数定位4次，那么会测得Z小浓度的4组数值，用符号E表示，以及Zda浓度的4组数值，用符号F表示。

　　然后就可以对生化分析仪交叉污染率进行计算，交叉污染率和溶液浓度值有关，浓度从高到低计算值以及从低到高计算值是不同的，所以样品的交叉污染率也是不同的，但无论如何，都要在2%之内。用符号C_OEF和C_OFE表示样品交叉率，相关的计算公式如下：

　　C_OEF={(F₄+F₂+F₃)/3-F₁}/{(F₄+F₂+F₃)/3-(E₂+E₃+E₄)/3}×1**%

　　C_OFE={E₁-(E₂+E₃+E₄)/3}/{(F₄+F₂+F₃)/3-(E₂+E₃+E₄)/3}×1**%