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凝胶成像系统是对DNA/RNA/蛋白质等凝胶电泳不同染色及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析的仪器。凝胶成像系统常用于分子量计算,密度扫描,密度定量,PCR定量等生物工程常规研究。
1、凝胶成像系统像素越高是不是成像更清晰,产品就越好?
像素是要针对成像设备来看的,CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCD来说,Z重要的指标是CCD的尺寸大小,尺寸越大其本身价值就成几何倍地增长。
2、CCD和CMOS有什么区别,哪种芯片更好?
CCD是集成在半导体单晶材料上,而CMOS是集成在被称做金属氧化物的半导体材料上。
在成像方面,相同像素下CCD的成像通透性、明锐度都很好,色彩还原、曝光可以保证基本准确。而CMOS的产品往往通透性一般,对实物的色彩还原能力偏弱,曝光也都不太好,由于自身物理特性的原因,CMOS的成像质量和CCD还是有一定距离的。但由于CMOS低廉的价格以及高度的整合性,因此在凝胶成像系统中得到了广泛的应用。
3、什么是分辨率,它与像素值有什么关系?
分辨率的大小和像素值是分不开的,像素值是指凝胶成像系统能分辨到的Z小的感光元件,平时说的多少万像素就是这些感光元件的个数了。
一般来讲像素越多,成像也就越清晰细腻,当然这其中还要受许多因素限制。但是高像素也不一定是好的CCD,其原因就是像素大小,也是很重要的因素,相同数目的像素,排列越密集,像素之间就越容易出现电流干扰,容易出现“噪点”等干扰成像质量的现象出现。由于制造工艺的限制,增加尺寸,成本将会以几何级数提高。
4、什么是动态范围值,它如何反映CCD的性能?
动态范围决定着能否同时在一张胶上同时看到强的信号和弱的信号,而且他们之间能保持比较好的定量关系。一般动态范围采用数量级来表示,这个数越大,表明动态范围越宽。灰阶表示一种表征光亮度的方法,12bit表示从Z暗到Z亮等分为212=4096个级别,16bit即分为216个级别,可见bit值越高能分出的细微差别越大。
目前来说,市场上主流的凝胶成像系统的CCD以12bit为主,16bit的凝胶成像系统,一般情况下,分辨率均在200万像素左右,对于真正的16bit,而像素值又近400万的CCD是非常少见的。
5、为什么凝胶成像系统需要制冷CCD,它适用于哪些情况?
凝胶成像系统曝光超过5-10秒时,CCD芯片就会发热,没有致冷设备的芯片,“热”或者白的像素点就会遮盖图像,图像到处可见雪花。
制冷CCD的适用性:荧光及化学发光本身较弱,所以对CCD噪音的降低要求很高,应选用高分辨率数字冷却CCD相机结合高通透镜头的凝胶成像系统,使其能够捕获到信号极其微弱的荧光及化学发光样品图像,并且能够Zda程度的降低噪音,减少背景,提供出色的图像清晰度。
6、如何选择凝胶成像系统的光学镜头?
光学镜头是凝胶成像系统视觉系统中必不可少的部件,直接影响成像质量的优劣,影响算法的实现和效果。光学镜头规格繁多,有时不免头晕。
光学镜头从焦距上可分为短焦镜头、中焦镜头,长焦镜头;从视场大小分有广角、标准,远摄镜头;结构上分有固定光圈定焦镜头,手动光圈定焦镜头,自动光圈定焦镜头,手动变焦镜头、自动变焦镜头,自动光圈电动变焦镜头,电动三可变(光圈、焦距、聚焦均可变)镜头等。
7、凝胶成像系统软件功能包括哪几个方面?
选择好成像系统后,凝胶成像系统配套的软件选择也很重要。硬件设备再好,如果不配上好的软件,也无法发挥它应有的功能。凝胶成像系统软件功能和用途都基本相似,Z关注的几个特点是:
①软件的基本功能:可对不同样品,如条带,斑点,细菌克隆,芯片,细胞或者活体动物等,进行定性、定量分析,加批注,输出图像等操作。
②图像采集方式:对于化学发光或多色荧光产品,凝胶成像系统软件应具备电影模式,可以进行图像多祯累计功能来增强线性动态范围和数据准确度。
③操作简便,凝胶成像系统软件应具备操作辅助工具,使软件操作更简单易用。Z好采用三步式泳道及条带分析,可以快速计算蛋白质和核酸的分子量及含量。
④数据库功能也是必不可少的,这样可以检索、分类或比较所有生成的图像。可利用不同的显示算法程序图像化显示条带差异。
⑤曝光方式:应采用单一曝光、多重曝光,累计曝光,延时(定时)曝光多种模式可选。
⑥记忆功能:凝胶成像系统软件能记忆并自动调用成像数据,这样你不用每次设置就能获得重复性好的结果。
⑦软件应配备两套以上,使用单机版,多用户版或网络版,用户可彼此独立操作,互不干扰,互不混淆。
8、能否在凝胶成像系统上直接切胶?
如需直接切胶,首先按凝胶成像系统中间的观察窗,打开装有进口防紫外玻璃的观察窗口,然后打开左右两侧专为割胶所设计的小门,即可进行切胶操作。
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