凝胶成像系统选购指南

　　凝胶成像系统是实验室里Z为常用的仪器之一，包括成像系统和分析凝胶图片的软件系统。在选购凝胶成像系统时需要分别从这两个部分来考察凝胶成像系统的功能参数，拥有一台好的、运行稳定的设备是实验者的心愿。

凝胶成像系统的选购方法

　　市场上凝胶成像系统林林种种，但是从成像原理上可以分成两大类，分别是拍照成像和扫描成像。

　　拍照成像选购要素：

　　拍照成像简单说就是样品和相机的相对位置不动，可以进行单次成像或多次成像。拍照成像目前主要采用CCD相机成像，由于可以设置不同的曝光时间，常被用来进行微弱的化学发光及生物发光的成像。

　　如果主要用凝胶成像系统来拍普通核酸胶或蛋白胶，那么几乎市场上所有的凝胶成像系统都可以很好的满足需求。这时除了价格这个决定因素外，能比较的也就是一些操作等不太重要的指标了。但是对于准备做化学发光的用户，对敏感度要求高，同时还要求比较宽的动态范围。因为要想捕获到微弱的化学发光，需要上佳的CCD相机和镜头。

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　　一般来说，CCD相机的冷却温度和背景噪音息息相关，温度越低，噪音就越低。因此，-25℃的制冷温度是对相机的diyi个要求(更低的温度，噪音降低效果不明显，而量子效率又会受很大影响);另外，较大的像素能够提供更高的捕光效率;所以对于相同大小的CCD芯片，需要注意像素的尺寸。

　　镜头的参数就简单了，由于只需要观察近距离的样品，而且一般可以调整样品位置，所以基本无需选择长镜头或者变焦镜头;但是，由于需要检测微弱的化学发光，镜头的光圈则至关重要，一般F值越小，其通光量越大，而且成平方反比关系，因此一般需要选择光圈F值尽量小的镜头。

　　另外，如果镜头是电动的，可以省却打开机箱，反复手工调整光圈和聚焦等的烦恼。其他需要考虑的包括光源、滤光片和暗箱等部件。光源的种类和发光的均一度，滤光片的数量和暗箱的遮光效果等均在考虑范围之内。

　　扫描成像选购要素：

　　扫描成像是相机对样品进行局部成像，然后通过样品或相机的移动对整个样品进行成像。扫描成像由于精度高、重复性好被广泛用于大型样品以及多通道凝胶成像系统中。可以说，对于大型样品或多通道凝胶成像系统应用，能选择扫描成像的，尽量不要选择拍照成像。

　　凝胶成像系统扫描成像的灵敏度一般不是考虑要素，Z关注的应该是分辨率，当然分辨率只要达到要求即可，对于小型的凝胶、膜和微孔板来说，一般分辨率在25um左右应该是足够了。

　　在满足分辨率后，还有一个更重要的参数，那就是动态范围，简单的说，动态范围决定着你能否同时在一张胶上同时看到强的信号和弱的信号，而且他们之间保持比较好的定量关系。一般动态范围采用数量级来表示，这个数越大，表明动态范围越宽。对于激光扫描成像系统，情况就复杂一些。从激光器、滤光片到分光镜和检测器还有好多需要考虑和比较的。

凝胶成像系统选购依据

　　1、核酸电泳凝胶：

　　一般此类凝胶都采用EB染色、紫外激发，而且凝胶较小。推荐采用一般的凝胶成像系统即可完成。

　　2、蛋白电泳凝胶：

　　一般此类凝胶采用考染或银染，白光透射成像。对于小型凝胶可以选择一般的凝胶成像系统，但是对于大型凝胶，特别是双向电泳凝胶，由于CCD拍照成像会有几何扭曲，而且透镜效应也会导致不同区域的信号强度差异，另外CCD拍照也无法保证不同凝胶的成像参数保持一致，因此扫描成像是Z好选择。

　　3、转印膜：

　　一般转印膜有比色法显色、同位素、化学发光和荧光等不同检测手段。①比色法显色就是产生有颜色的条带或斑点，一般采用普通的凝胶成像系统即可。②同位素可以采用压胶片曝光的方法，但是费时、费力而且容易过饱和。③化学发光是目前Z常用的蛋白印迹的检测手段，冷CCD拍照成像对这种微弱的光信号是Z合适的。④荧光染料具有Z宽的动态范围，而且还能够提供多通路的检测途径(同样适用于凝胶)。

　　如果需要对邻近或重叠的目标分子进行成像，那么多通道荧光检测是不二之选。这时扫描成像是Z佳选择，这样选择不仅仅是因为扫描成像能够带来更高的灵敏度和分辨率，更重要的是，不同通道之间没有几何扭曲，拟合性好。

　　4、微孔板及其他特殊需求：

　　对于拍照成像而言，由于几何扭曲的问题，对微孔板成像就变得比较复杂了，一般必须一个专用的校正装置才可完成。如果凝胶成像系统采用扫描成像一般不需要任何额外附件。