生物显微镜校准规范

　　生物显微镜是一种供YL卫生机构、实验室、高等院校、科研院所观察和测量微生物、细胞、细菌的结构尺寸，生物组织切片;以及活体组织培养、流质沉淀量、粉末和细小颗粒的粒度等参数的测量设备。

　　生物显微镜在组织学、细胞学、寄生虫学、微生物学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、植物学等领域中广泛应用。为得到清晰明亮的理想图像和满意的镜检效果，分辨率是观察效果Z重要的指标。从物理学角度看，生物显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物镜性能的限制。因此，应对生物显微镜各项光学技术参数按标准进行校准，并对校准过程中涉及量值准确要求的项目采取质量控制，以保证测量结果的准确可靠。

生物显微镜的校准项目

　　1、外观检查。

　　2、微调手轮刻线间隔量：带有刻度的微调手轮，其平均刻线间隔量应为1μm或其整数倍。

　　3、生物显微镜物镜放大倍数误差：生物显微镜物镜放大率误差不超过±5%。

　　4、双目显微镜左右两系统放大倍数差：双目显微镜的左右两系统放大倍数差不超过2%。

　　5、双目显微镜左右视场ZX偏差。

　　6、目镜标尺的刻线间隔误差：目镜标尺的刻线间隔误差不超过±0.01mm。

生物显微镜校准环境条件

　　环境温度：(20±10)℃;相对湿度：45%～85%。

生物显微镜校准方法

　　1、外观方面

　　生物显微镜应标有名称、型号、编号、制造厂等信息。光学系统在整个视场内成像应清晰，视场内不应有影响观察的阴影或反射光斑等，成像的清晰区域应与视场同心。

　　生物显微镜各部分运动应灵活平稳，无卡滞和跳动现象，视场内照明均匀。双目显微镜左右两系统的光谱色应基本一致，无明显的明暗差异。

　　2、微调手轮刻线间隔量

　　微调手轮应灵活平稳，松紧适中。微调手轮刻线间隔量应测量手轮的起始、中间、末端三个位置。测量前，将指示表用专用夹具固定在生物显微镜上，保证指示表与显微镜紧固、牢靠，固定指示表时应保证测量头与载物台垂直接触。调节生物显微镜调焦手轮将指示表读数置零。旋转调焦手轮10个刻度，读取示值，以指示值的1/10作为测量结果。将在起始、中间、末端三个位置上的测量平均值作为校准结果。

　　3、生物显微镜物镜放大倍数误差

　　调节光源至适度位置，将带刻度分划尺的目镜安装在生物显微镜其中一个套筒上，将标准玻璃刻度尺置于载物台上，调节目镜与标准玻璃尺使分划尺刻线与标准玻璃尺刻线平行，避免出现测量误差。调节载物台使玻璃尺零位与分划尺一端对齐，然后直接读数。

　　β_物=L'/L

　　式中：L——标准玻璃刻度尺间距，mm;

　　L'——目镜分划板上读取的相应标准玻璃刻度尺像的问距，mm;

　　物镜放大倍数误差以实测放大倍数与名义放大倍数之差的相对误差确定，具体计算公式如下：

　　Δβ=(β_物-β_理论)/β_物×1**%

　　式中：Δβ——物镜放大倍数误差;

　　β_物——物镜放大倍数实测值;

　　β_理论——物镜放大倍数名义值。

　　4、双目显微镜左右两系统放大倍数差

　　依据生物显微镜物镜放大倍数误差的操作步骤，用带刻度分划尺的目镜替换对显微镜左右两个目镜并分别进行测量，得到两观察系统放大倍数，其差值即为校准结果。

　　5、双目显微镜左右视场ZX偏差

　　将十字分划板置于载物台上，将带刻度分划尺的目镜安装在生物显微镜左筒，调节十字分划板与目镜，使十字分划与目镜内的十字ZX完全重合，然后将目镜从左筒放人右筒读出其与分划板ZX偏离值即为测量值。

　　6、目镜标尺的刻线间隔误差

　　在对生物显微镜物镜放大倍数误差进行校准后，该项目可以不进行计量校准。具体校准方法为在载物台上放置分度值为0.01mm的标准玻璃刻度尺，安装10倍显微目镜，调焦至目镜视场清晰。调节显微目镜与标准玻璃刻度尺使二者端线对齐，并保证二者线纹刻度方向平行。

　　此时在目镜视场中直接读取二者之差△L，即为目镜标尺相应刻线的间隔误差。若显微镜目镜带有十字刻线，校准方法与上述方法相同，测量结果应取两方向Zda值为间隔误差。目镜标尺的刻线间隔误差的测量需在目镜标尺全长范围内均匀分布的5点进行。

　　随着科学技术的飞速发展，生物显微镜已成为观察的微生物、细胞、细菌的结构尺寸;生物组织切片、以及活体组织培养、透明或半透明微体;粉末及细小颗粒的粒度等参数的测量设备，应对其进行校准以确认量值，特别是一些新的类型，在载物台或目镜分划板上增加了指示量值的功能。基于以上情况，为使校准活动更具有准确性与科学性，实施有效的质量控制亦显得尤为重要。