为您推荐:
仪器网 荧光显微镜 荧光显微镜结构
产品导购地图

荧光显微镜结构

  荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具,由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。荧光显微镜利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。

  一、光源:

  荧光显微镜多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光,足以激发各类荧光物质,因此,为荧光显微镜普遍采用。超高压汞灯也散发大量热能。因此,灯室必须有良好的散热条件,工作环境温度不宜太高。

  超高压汞灯在使用初期不需高电压即可引燃,使用一些时间后,则需要高压启动(约为15000V),启动后,维持工作电压一般为50~60V,工作电流约4A左右。200W超高压汞灯的平均寿命,在每次使用2h的情况下约为200h,开动一次工作时间愈短,则寿命愈短,如开一次只工作20min,则寿命降低50%。

  因此,使用荧光显微镜时尽量减少启动次数。灯泡在使用过程中,其光效是逐渐降低的。灯熄灭后要等待冷却才能重新启动。点燃灯泡后不可立即关闭,以免水银蒸发不完全而损坏电极,一般需要等15min。由于超高压汞灯压力很高,紫外线强烈,因此灯泡必须置灯室中方可点燃,以免伤害眼睛和发生爆炸时造成操作者受伤。

荧光显微镜结构.jpg

  二、滤色系统:

  滤色系统是荧光显微镜的重要部位,由激发滤板和压制滤板组成。滤板型号,各厂家名称常不统一。滤板一般都以基本色调命名,前面字母代表色调,后面字母代表玻璃,数字代表型号特点。

  1、激发滤板:根据光源和荧光色素的特点,提供一定波长范围的激发光。

  紫外光激发滤板:此滤板可使400nm以下的紫外光透过,阻挡400nm以上的可见光通过。常用型号为UG-1或UG-5,外加一块BG-38,以除去红色尾波。

  紫外蓝光激发滤板:此滤板可使300~450nm范围内的光通过。常用型号为ZB-2或ZB-3,外加BG-38。

  紫蓝光激发滤板:它可使350~490nm的光通过。常用型号为QB24(BG12)。

  Zda吸收峰在500nm以上者的荧光素(如罗达明色素)可用蓝绿滤板(如B-7)激发。

  激发滤板分薄厚两种,一般暗视野选用薄滤板,亮视野荧光显微镜可选用厚一些。基本要求是以获得Z明亮的荧光和Z好的背景为准。

  2、压制滤板:压制滤板的作用是完全阻挡激发光通过,提供相应滤长范围的荧光。

  紫外光压制滤板:可通过可见光、阻挡紫外光通过。能与UG-1或UG-5组合。常用GG-3K430或GG-6K460。

  紫蓝光压制滤板:能通过510nm以上滤长的荧光(绿到红),能与BG-12组合。通常用OG-4K510或OG-1K530。

  紫外紫光压制滤板:能通过460nm以上波长的荧光(蓝到红),可与BG-3组合,常用OG-11K470。

  三、反光镜:

  荧光显微镜反光镜的反光层一般是镀铝的,因为铝对紫外光和可见光的蓝紫区吸收少,反射达90%以上,而银的反射只有70%;一般使用平面反光镜。

  四、聚光镜:

  专为荧光显微镜设计制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成。分明视野聚光器的暗视野聚光器两种。还有相差荧光聚光器。

  1.明视野聚光器:在一般荧光显微镜上多用明视野聚光器,它具有聚光力强,使用方便,特别适于低、中倍放大的标本观察。

  2.暗视野聚光器:暗视野聚光器在荧光显微镜中的应用日益广泛。因为激发光不直接进入物镜,因而除散射光外,激发光也不进入目镜,可以使用薄的激发滤板,增强激发光的强度,压制滤板也可以很薄,因紫外光激发时,可用无色滤板(不透过紫外)而仍然产生黑暗的背景。从而增强了荧光图像的亮度和反衬度,提高了图像的质量,观察舒适,可能发现亮视野难以分辨的细微荧光颗粒。

  3.相差荧光聚光器:相差聚光器与相差物镜配合使用,可同时进行相差和荧光联合观察,既能看到荧光图像,又能看到相差图像,有助于荧光的定位准确。一般荧光观察很少需要这种聚光器。

荧光显微镜.jpg

  五、物镜:

  荧光显微镜各种物镜均可应用,但Z好用消色差的物镜,因其自体荧光极微且透光性能(波长范围)适合于荧光。由于图像在显微镜视野中的荧光亮度与物镜镜口率的平方成正比,而与其放大倍数成反比,所以为了提高荧光图像的亮度,应使用镜口率大的物镜。尤其在高倍放大其影响非常明显。因此对荧光不够强的标本,应使用镜口率大的物镜,配合以尽可能低的目镜(4x,5x,6.3x等)。

  六、目镜:

  在荧光显微镜中多用低倍目镜,如5x和6.3x。过去多用单筒目镜,因为其亮度比双筒目镜高一倍以上,但目前研究型荧光显微镜多用双筒目镜,观察很方便。

  七、落射光装置:

  落射光装置是从荧光显微镜光源来的光射到干涉分光滤镜后,波长短的部分(紫外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射,当滤镜对向光源呈45°倾斜时,则垂直射向物镜,经物镜射向标本,使标本受到激发,这时物镜直接起聚光器的作用。同时,滤长长的部分(绿、黄、红等),对滤镜是可透的,因此,不向物镜方向反射,滤镜起了激发滤板作用,由于标本的荧光处在可见光长波区,可透过滤镜而到达目镜观察,荧光图像的亮度随着放大倍数增大而提高,在高放大时比透射光源强。

  落射光装置除具有透射式光源的功能外,更适用于不透明及半透明标本,如厚片、滤膜、菌落、组织培养标本等的直接观察。近年研制的新型荧光显微镜多采用落射光装置,称之为落射荧光显微镜。

2004-12-01 浏览次数:6445次
本文来源:https://www.yiqi.com/daogou/detail_1732.html
延伸阅读
  • 光学显微镜原理
    光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。光学显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成,是人类进入原子时代的标志。

    12-01

  • 光学显微镜的分类
    光学显微镜主要由光学系统及支撑它们的机械结构组成,光学系统包括物镜、目镜和聚光镜,都是由各种光学玻璃做成的复杂化了的放大镜。光学显微镜主要用于放大微小物体,使其为人的肉眼所能看见。

    12-01

  • 光学显微镜的结构
    光学显微镜是一种既古老又年轻的科学工具,从诞生至今,已有三百年的历史。光学显微镜的用途十分广泛,例如在生物学、化学、物理学、天文学等科研工作中都是离不开光学显微镜。

    12-01

  • 光学显微镜使用方法
    光学显微镜是一种精密的光学仪器,它广泛应用于现代科学技术和生产的各个领域,是一种十分重要的观测工具。在生物学、医学、农业、畜牧、地质、矿产和一些工业部门内,光学显微镜有特殊的地位,发挥重要的作用。

    12-01

  • 光学显微镜的故障分析|维护保养
    光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。主要由载物台、聚光照明系统、物镜、目镜和调焦机组成,被广泛用于多个领域中。

    12-01

  • 光学显微镜的发展历史|发展趋势
    光学显微镜是一种精密的光学仪器,已有300多年的发展史。自从有了光学显微镜,人们看到了过去看不到的许多微小生物和构成生物的基本单元——细胞,使我们对生物体的生命活动规律有了更进一步的认识。

    12-01

  • 查看更多精彩>>
同类型导购:

荧光显微镜产品导购

荧光显微镜产品资料

荧光显微镜产品问答

荧光显微镜产品厂家

最新资讯

看过该文章的人还看了以下文章

官方微信

仪器网微信服务号

扫码获取最新信息


仪器网官方订阅号

扫码获取最新信息

在线客服

咨询客服

在线客服
工作日:  9:00-18:00
联系客服 企业专属客服
电话客服:  400-822-6768
工作日:  9:00-18:00
订阅商机

仪采招微信公众号

采购信息一键获取海量商机轻松掌控