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质谱流式细胞技术的优势

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质谱流式细胞技术(Mass Cytometry)是利用质谱原理对单细胞进行多参数检测的流式技术。它继承了传统流式细胞仪的高速分析的特点,又具有质谱检测的高分辨能力,是流式细胞技术一个新的发展方向。

技术优势:

荧光基团发射光谱一般比较宽,其间往往会发生重叠,会带来一些问题:一方面限制了检测通道的数量(小于20个);另一方面,它会带来严重的串色问题,很多通道的信号需要复杂的补偿计算。而利用ICP质谱作为检测手段,与传统流式细胞技术相比,质谱流式细胞技术具有以下优势  :

一、通道数量增加很多

质谱流式细胞仪中的ICP质谱装置具有非常宽的原子量检测范围(88~210Da),因此可以同时检测上百个不同的参数。

二、通道间没有干扰,不需要计算补偿

ICP质谱具有超高的分辨能力,可以完全区分开用来标记的各种元素(如上图所示)。实验数据表明,其相邻通道间的干扰小于0.3%,几乎可以忽略不计,不需要计算补偿。如此既使实验流程得到简化,又节省了标本和试剂。

三、金属标签数量多,并具有极低的背景

用来作为标签的金属元素在细胞中的含量非常低,因为金属标签与细胞组分的非特异性结合能力非常低,所以信号的背景也非常低。到目前为止,用来标记抗体的金属标签有30多种,但随着技术进步,会有更多元素可以用来作为标签,因此其种类会进一步增加。

四、多样化的数据处理方式,实现对样品的深入分析  。

质谱流式细胞仪通道数量的激增带来信息量的成倍增长。传统的流式分析方法已经不能完全满足需求,所以需要对数据进行各种降维处理,提取出其中有用的生物学信息。常用的分析方法有:SPADE、PCA、viSNE以及Gemstone等。


2005-04-16 浏览次数:1379次
本文来源:https://www.yiqi.com/daogou/detail_3159.html
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