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1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术(patch clamp recording technique)。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的或多个的离子通道分子活动的技术。它和基因克隆技术(gene cloning)并架齐驱,给生命科学研究带来了巨大的前进动力。
传统膜片钳技术优点:
1.对细胞膜通道电流的记录具有很高的分辨率,信息含量大。
2.灵活性好,既可以改变细胞膜电位,又能够控制改变细胞内外溶液的成分。
3.应用广泛:能够分析检测一切离子通道类型。
4.可以记录到pA级电流的变化以及单通道开关状态,所以具有非常高的灵敏性。
5.与荧光标记与反射性标记等手段相比具有更加高的精确性和权威性。
传统膜片钳技术缺点:
1.仅可以对单通道进行操作,通量低,不能够对细胞之间的通信与细胞网络进行研究,难以方便的换取细胞內液。
2.在检测的过程中,因为通道表达少而导致丢失数据点造成数据不准确,需要大量的进行实验。
3.要求操作者需要极高的实验数据。
全自动膜片钳技术优点:
1.全自动膜片钳技术效率非常高,是传统膜片钳技术效率的20-300倍。
2.自动化,可以节省实验人员的很多时间和精力。如寻找细胞,形成封接,破膜等整个实验操作全都实现自动化。
3.不再需要传统膜片钳技术所需的显微镜,微操纵器,微电极拉制仪,屏蔽网,灌流、浴漕等等。
4.人为操作的误差少,获得的数据准确性高。
5.对于药物的加样设计表现优异。
全自动膜片钳技术缺点:
1.只能在悬浮细胞实验时使用。
2。仅能对全细胞模式、穿孔膜片钳模式、细胞贴附式单通道模式进行记录,而不可以对其他模式进行记录。
3.和手动膜片钳相比,仪器及耗材价格更贵。
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