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平板菌落计数法是菌落计数器主要采用的技术。此技术是一种一种常见的活菌计数法。梯度稀释待测的菌液,在凝固前均匀混合合适的固体培养基和获取的一定体积的稀释菌液,或者在已凝固的固体培养基平板上将菌液涂布,恒温培养后,平板上出现的菌落数菌液稀释度,就能将从前菌液的细菌的数量计算出来。
在微生物检测中,计算菌落总数是常见的项目,在检验的过程中,任何一个环节都需要谨慎仔细,使得检测的结果保持准确。我们Z常使用的检测方法就是国标法采用的平板计数法,然而其操作时间偏长,过程也非常复杂,虽然有其他更加简单,节约时间的方法,但是那些方法有相对较高的成本,并且实验的种类单一,有的只针对特定的食品种类。新的科学技术在检测方法中的应用需要得到我们更加积极旳关注,从而使得检测变得更加经济、便捷和可靠。
平板计数法方法步骤
如何使用平板计数法计数呢?这是许多技术人员非常关心的问题,利用平板计数琼脂做菌落总数计数的步骤方法如下:
1.选取的平板上生长的菌落数应在30-300CFU之间,并且没有蔓延,对菌落进行计数。
2.不要选取有较大片状生长菌落的平板。
3.若平板的一半不到有片状菌落生长,另一半平板菌落则分布均匀,那么可以先对分布均匀的一半计算,然后再2。
4.若菌落间无明显界限的链状出现在平板上,那么每条单链作为一个菌落计算。
5.若菌落数不足100CFU,那么就“四舍五入”,以整数报告。
6.若菌落数不少于100CFU,则第三位数字“四舍五入”,取前两位数字,后面用0替代位数,也可以使用10的指数的形式表示。
7.如果所有平板上都是蔓延菌落,不能计数,那么就对菌落蔓延情况进行报告。
8.如果空白对照上有菌落生长,那么此次检测结果无效。
9.填写报告时,以CFU/g为称重样品称重单位,以CFU/ml为样品体积单位。
平板菌落计数法的优点:
使用接种环对少许待分离的材料进行沾取,在无菌平板表面进行扇形划线、平行划线和其他形式的连续划线,随着划线次数的增加,微生物细胞数量将减少,并渐渐地分散开来,若划线适宜的话微生物能一一分散,所需的实验器材简单,成本低,操作过程容易,技术要求低。
平板菌落计数法的缺点:
操作步骤繁琐,耗费时间长极易被环境杂菌污染所干扰,仅仅对微生物数量很小的样品适宜。
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