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简单的说,PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。下面就让小编带你了解一下PCR的发展、使用和保养。
发展状况:
1.梯度水浴法
能够使温度迅速改变,时间准确,能够对温度进行调节,对于实验研究来说非常适合,不仅省时省力而且能够获得非常明显的效果。
2.空气驱动循环恒温装置
此系统作为热传导的媒介是空气,力求使部件的成本得到降低,机箱、热源、冷空气源、控制器以及辅助电器元件等部分共同构成此装置。
此装置不需要金属的精密加工,使成本得到降低。整个系统没有液体流动,不需要使用制冷液,所以很安全,能够达到+-1摄氏度恒温精度。
然而,此装置单纯依靠外部空气的制冷,环境温度会对其产生影响。
3.变温金属块作恒温装置
电热发热和半导体发热都为其的加热方式,半导体制冷以及压缩机制冷等均为其的制冷方式。
变温金属块作恒温装置产品质量很高且具有比较稳定的性能。
使用与保养
临床基因扩增实验室的第三区为PCR仪应该放置的区域。仪器在水平台上放置,电源电压必须和仪器要求的电压相同,并且接地。仪器必须要放置在距离水、明火和腐蚀性物质比较远色地方。
工作室的室温维持在15-25摄氏度之间,保证通风散热。Z好接稳压电源,特别是半导体升温降温的设备。
当每次实验的时候需要将样品管放满扩增仪内的孔位。如果只有很少的样品,可以使用空管替代,从而使实验的一致性和重复性得到保证。
实验结束之后,应该将孔位内存在的水分及时擦干,并且将机盖盖上。应该定期使用电子测温仪对温度进行校准。如果是水浴扩增仪,那么应当及时对水分进行补充,防止水量过少,对温度的稳定性产生影响。对热盖以及反应孔进行定期的清洁。
可以使用家用洗涤剂对反应槽和内壁进行清洁,然而,值得注意的是必须先将反应槽取出再进行清洁。
如果毛细管破碎了,那么需要首先使用毛刷清除碎片,再使用70%的酒精对反应槽进行清洁。不需要使用无水酒精对光路部分进行清洁。
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