电泳历史及聚丙烯酰胺凝胶电泳应用

电泳(electrophoresis, EP)指的是带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术叫做电泳技术。

历史

在电场中带电荷的粒子或分子移动的现象，指的是电泳（Electrophoresis）。在电场中能够作定向泳动的物质包括大分子的蛋白质，多肽，病毒粒子，甚至细胞或小分子的氨基酸，核苷等。1937年，能够进行血清蛋白电泳的界面电泳仪被成功地研制了出来。在1948年，Wielamd 和Kanig以滤纸条做载体成功地进行了纸上电泳。从此以后，电泳技术越来越被人们所接受和越来越受到人们的重视，从而使得以滤纸，各种纤维素粉，淀粉凝胶，琼脂和琼脂糖凝胶，醋酸纤维素薄膜，聚丙烯酰胺凝胶等为载体，和如银氨染色，考马斯亮蓝等增染试剂相结合能够使得生物样品着色与分辨能力大提高和促进的电泳技术发展出来。另外，电泳分离结合免疫反应，发展出了微量和超微量（1ng～0.001ng）水平的分辨率，从而迅速推广和应用了电泳技术。

应用

1．琼脂或琼脂糖凝胶免疫电泳

琼脂或琼脂糖凝胶免疫电泳可用于①对两种抗原是否一致进行检验。②对抗某种已知抗原的抗体是否为抗血清制剂所具备进行研究。③对蛋白质混合物的组分进行分析。④对蛋白质制剂的纯度进行检查。

2．聚丙烯酰胺凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳，适用凝胶扫描仪对电泳后的凝胶进行扫描，从而获得定量的结果。扫描样品单向电泳后的区带和双向电泳后的斑点为凝胶扫描仪的主要用途。

3．SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳能够对蛋白质分子量进行测定。蛋白质分子结合带大量电荷的SDS，使得蛋白质分子原有电荷的影响消除了，从而使恒定的荷/质比得到。测定时间短，分辨率高，所需样品量极少（1～100μg）是这种方法的优点，然而其仅仅对

球形或基本上呈球形的蛋白质适用。如木瓜蛋白酶，核糖核酸酶等一些蛋白质与SDS结合相对比较困难，这个时候就不能够得到准确的测定结果。

4．聚丙烯酰胺凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳能够被用来鉴定蛋白质纯度。电荷效应和分子筛效应同时为聚丙烯酰胺凝胶电泳所具备，不但能够分离开分子大小相同而带不同数量电荷的物质，而且还能够分离开带相同数量电荷而分子大小不同的物质。和一般层析方法和电泳方法，其分辨率要高出很多。其的重复性好，没有电渗作用。