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琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
一、配胶的注意事项
1.要对电子秤的精度保持时刻注意,保证电子秤干净,按照浓度的不同对琼脂糖进行称取。
2.需要适当的对TAE进行添加,避免配出来的胶太薄,使得浓度过低或者胶孔过浅。
3.倒胶的时候必须要洗干净胶托,并且将胶擦拭干净。倒胶的时候要等到一定的温度再摇匀尽量不要让气泡产生。如果胶液的温度太高,要将其顶在胶托上,避免胶托变形。
二、点样电泳的注意事项
1.要使96孔塑料板干净,要点均匀loading,将点的量控制再1-2微升,并且将对应的标记做好。
2.加样的时候要上紧枪头,吸样准确均匀,排液的时候,不要在吸头留有残留。
3.在点样完成后需要将胶垫及时的盖上,值得注意的是不要将盖子盖反。
4.Z好再点电泳之前先对待用胶进行检查来确定其是否合格。点电泳时,要对准胶孔,尽量将所有的样都点完。
5.在点样完成后,不要将点marker忘记并且将胶位摆正。不要插倒正负极,要盖紧电泳槽的盖子。
三、EB染色的注意事项
1.需要准确的切胶,要稳定的取胶,要慎重的泡胶,防止EB溅起。
2.需要及时丢弃碰到EB的手套。
3.要适时的更换EB液,要清洗盘子。
4.不要将抹布交叉使用,要对抹布严格的区分。
四、凝胶图像分析仪的使用的注意事项
1.为了不对胶图的清晰度产生影响,在使用之前需要注意清洁。
2.照胶的时候使用紫外灯的时间应当尽量的减少。
3.拍照的时候,应当先将摄像头关掉再将紫外灯关掉,不能颠倒顺序,应该根据照胶的流程严格的执行。
4.要及时丢弃照好的胶。
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