水平板电泳槽结构、使用方法及水平板电泳注意事项

不同的物质在一定的电场强度下，因为所带电荷不同，所以受到的引力不同，往相反的电极泳动的速度不同从而达到分离的目的。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离目的的技术，称为电泳技术。

主要结构：

缓冲液的主槽、凝胶托盘、试样格（梳子）、挡板和电泳导线共同组成水平电泳槽。

使用方法：

1.首先在平台上放置凝胶托盘，在槽中插入挡板。冷却融化的琼脂糖溶液到55摄氏度，使用少量的琼脂糖凝胶封边玻璃板，放样品梳。然后连续地往模子里倒入融化的琼脂糖溶液（厚度取决于样品的浓度，需要防止混入气泡），在室温条件下凝固。

2.等到凝胶聚合后，将梳子轻轻地拔掉，先拔一边，垂直拔出会导致胶孔产生真空，带出部分凝胶。往电泳槽内移入凝胶托盘，将缓冲液倒入，凝胶必须全部被浸没。

3.往梳井里加样，防止气泡进入，不能将枪头插入太深，避免使得胶块穿透。

4.将上盖盖好，将电泳槽和电源之间的电泳导线连接。

5.留意正负极不要接错，检查完毕后将电泳仪电源打开。电压和电流的大小通过凝胶板的厚薄来选择。

6.当溴酚蓝指示剂前沿达到胶底部的3/4时将电泳停止。在完成电泳实验后，需先将电泳仪电源关闭，然后将电泳导线拔出，再将电泳槽上盖打开，将凝胶托盘取出。

7.往染色区的通风橱子中移入凝胶使用EB染色液进行10-20min的染色，然后使用冲洗盘将胶片上多余的EB染色液冲洗掉，再使用海绵进行两次彻底的吸水，直到没有水痕留在胶片上，使用保鲜膜将胶片包裹好，放入凝胶成像仪中进行凝胶成像。

注意事项：

1.不允许将EB染色液加入电泳槽中，必须在电泳结束后且在染色区内进行染色。

2.正负级分不清楚，造成样品跑入缓冲液。黑色为负极，红色为正极，样品由负极往正极跑，需在靠近负极一端加样。

3.加样的时候，不能将枪头插得太深，避免胶块被穿透。

4.必须按照marker要求的浓度对胶的浓度进行制备，不然，小分子物质会从胶块中跑出。

5.若没有经验，Z好定时，不然样品可能因为疏忽从胶块中跑出。

6.样品必须在上样缓冲液中完全溶解，不然在凝胶中不能移动。采用同种缓冲液制胶和电泳，点样必须在缓冲液加到凝胶之上以后。