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核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。下面就让小编为你介绍一下总RNA抽提试剂TRIZOL。
TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂,能够直接将总RNA由细胞或组织中提取出来。苯酚、异硫氰酸胍等物质包含其中,可以将细胞迅速破碎并且对细胞释放出的核酸酶起YZ作用。苯酚为TRIZOL的主要成分。TRIZOL在破碎和溶解细胞时可以使RNA的完整性得以保持,所以十分有用于RNA的纯化与RNA的标准化。
成分
苯酚为TRIZOL的主要成分,将细胞裂解,解聚释放出细胞中的蛋白,核酸物质为苯酚的主要作用。尽管苯酚能够有效地使蛋白质变性,然而RNA酶活性不能被其完全YZ,所以还将β-巯基乙醇、异硫氰酸胍、8-羟基喹啉等加入到了TRIzol中用于内源和外源RNase(RNA酶)的YZ。
TRIZOL是一种即用型试剂,能够将总RNA从细胞和组织中提取出来。在样品裂解或匀浆过程中,TRIZOL可以使RNA完整性得以保持。在将氯仿加入以后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中。将水相取出,RNA的沉淀回收可以使用异丙醇。
0.1%的8-羟基喹啉能够使RNase得到YZ,与氯仿联合使用能够使YZ作用增强。异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类QL的蛋白质变性剂,能够将蛋白质溶解并且消除蛋白质二级结构,降解细胞结构,使核蛋白迅速与核酸分离。对RNase蛋白质中的二硫键的破坏是β-巯基乙醇的主要作用。
基本特点
Trizol试剂能够对人、动物、植物、细菌不同组织的总RNA进行快速提取,使用该方法分离少量的组织(50-100 mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1 g)和细胞(>107)的效果都比较好。TRIZOL试剂操作上的简单性使多个的样品的同时处理被允许。能够在一小时内完成所有的操作。TRIZOL抽提的总RNA可以使DNA和蛋白的污染得以避免。所以可以用于分子克隆、RNA酶保护分析、体外翻译、poly(A)+ 选择、斑点杂交、RNA印迹分析。并且根据DNA、RNA和蛋白质在不同溶液中的溶解性质,能够分离纯化出不同层中的RNA(上层)、DNA(中层)、蛋白质(下层),有极好的效率。Trizol试剂可以对不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出起到促进作用。
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