核酸提取过程核酸的沉淀

核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究等多种领域得到广泛地应用。

沉淀的目的：

以从裂解体系中将核酸沉淀下来，从而使分离核酸与其它杂质（主要是盐）得以实现。对核酸来说，醇用量需要有一定比例以及有一定的盐作为标准的醇沉淀要求。然而不是说醇的比例不可更或者盐必不可少。通过实际的操作，我们发现，当裂解体系中核酸的浓度达到一定水平后，就算教科书中建议的盐不包含在体系中，对醇单独使用也能够将核酸沉淀下来，当然，可能会降低一定比例的得率。不要对标准方法的唯yi性的迷信为了解这一点的意义。反之，如果标准方法遇到纯度问题时，改善的方法为根据沉淀条件的调整是完全可以实现的。纯粹的异丙醇由一半异丙醇加一半高盐溶液来替代，能够使残留的多糖大大的降低。除此以外，还有一个问题，核酸的醇沉淀过程同样也是其它杂质的沉淀过程必须要坚信。尽管会使得核酸的得率有所降低，然而由于能够使纯度大大提高。

沉淀温度的选择：

如果有比较多的杂质在核酸抽提的起始样品，原则上沉淀不在低温下进行，低温沉淀可以使沉淀效率提高，当核酸有很低的的时候，会得到很明显的效果，当核酸有比较高的浓度时，不会有比较明显的效果，然而却会大大增加杂质增加的可能性。

沉淀剂的选择：

醇沉淀通常使用乙醇或者异丙醇，无论是乙醇还是异丙醇，它们对于质量的大的影响我们暂时还没有发现。乙醇沉淀的核酸颜色比较白，比较蓬松，容易在壁上移动，异丙醇沉淀的核酸颜色不是很白，比较紧凑，帖壁紧。乙醇用于大量核酸的沉淀，异丙醇用于少量核酸的沉淀。没有遇到过异丙醇更容易使盐沉淀的现象，不彻底的洗涤为出现该现象的因素。当然，体积小为异丙醇沉淀的Zda优点，能够在1.5ml离心管内完成绝大部分的小量抽提操作。然而由于其沉淀物很紧凑，洗涤时不容易洗涤到其ZX部分，因此放置一段时间使沉淀Z终变成蓬松的白色或者悬浮起沉淀为洗涤异丙醇沉淀的核酸的关键。除了乙醇和异丙醇可以用于核酸沉淀，核酸沉淀还能够使用PEG、LiCl、CTAB。尽管和醇沉淀相比较，它们的使用频率不会更高，然而却各自有特点。沉淀病毒颗粒的方便手段为PEG。CTAB能够将核酸从含多糖的裂解体系中沉淀下来，LiCl能够将RNA沉淀，从而使DNA去除得以实现。