细胞融合方法和意义

细胞融合使得异核体(heterokaryon)形成、通过细胞有丝分裂异核体进行核融合、Z终使得单核的杂种细胞形成为细胞融合的基本过程。

融合方法

诱发融合指的是在诱导剂处理之后，异种间的细胞才可以融合；自发融合指的是在同种细胞培养时，两个相邻的细胞自发合并。

电融合法

细胞膜表面的氧化还原电位经过直流电脉冲的诱导发生了改变，粘合了异种细胞且瞬间破裂质膜，然后开始连接质膜，一直到完整的膜闭和成功，使得融合体形成。

优点：有较高的融合率，较强的重复性，对细胞的伤害性弱。

有着比较简单的方法以及精巧的装置，融合过程能够通过显微镜进行观察和录像。

PEG诱导后的洗涤过程没有了，能够较好的控制诱导过程。

离心振动

细胞之间的融合通过离心机等机器的使用来实现，物理方法之一。

聚乙二醇（PEG）法

HOH2C（CH20CH2)nCH2OH为聚乙二醇（PEG）的结构。能够用作细胞融合剂的要求为分子量在200到6000之间。在将PEG高压灭菌之后，再将其和温热的Engle氏液混合。使用10%NaHCO3将pH调整到8.0～8.2，50%为常用的浓度，4,000为通常使用的分子量。如果PEG有过大的分子量，那么就会有太大的粘性，操作不容易，如果PEG只有较小的分子量，那么就没有有效的融合效应，而且还会有毒。

仙台病毒法融合

1、一起培养两种细胞，将病毒加入，4℃条件下，病毒在细胞膜上附着，并且相互凝聚两细胞。

2、37℃下，病毒与细胞膜发生反应，破环了细胞膜，这个时候Ca2+和Mg2+被需要，8.0一8.2为Z核酸的酸碱度。

3、穿通细胞膜连接部，修复周边连接部，这个时候Ca2+和ATP被需要。

4、巨大细胞被融合而成，此时ATP依然被需要。

意义

在生物界中有自发的细胞融合存在的现象，人们很早就发现。我们了解，不管是远缘杂交还是对多倍体技术进行利用，均需先将有性杂交实现。胚胎早期败育、不能受精以及杂交不亲合一般为亲缘关系较远的物种间杂交的常见表现。对于远缘杂交中的不亲和障碍进行克服，对性状进行改良，使得各种植物的优良遗传性状组合起来，从而将理想的新品种培育出来。生殖细胞的受精过程能够通过体细胞融合而避开，使上述种种麻烦得以避免，从而使得基因转移在亲缘更远的物种间实现，将自然界中所没有的新物种创造出来。