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核酸蛋白检测仪又紫外检测仪,是液相色谱实验中的一种紫外检测仪,和层析柱、恒流泵、自动部份收集器和液相色谱数据工作站等相互配备就使得一套完整的分离层析系统组成了。
其作为是生物化学、分子生物学、基因工程、制药、化工、农业、食品以及医院等有关科研部门和生产单位在分离分析工作中的工具不可或缺。
波长含义
1、A230nm
A230nm为碳水化合物Z高吸收峰的吸收波长,核酸样品纯度能够通过比值进行评估。2.5为纯DNA和RNA的A260/A230比值。如果比值小于2.0,那么表示样品受到了碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂的污染,需要对样品进行纯化。因为在很低DNA浓度的溶液中受到一些其他成分的干扰,是导致A230产生负值的主要原因。在下一个测定中,需要将样品的稀释度降低,就会校正A230的负值。
2.A320nm或A340nm
A320nm是检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应当和0.0接近。若没有,则表示有悬浮物存在于溶液中,需要对样品进行纯化,0通常为纯样品的A320的值。
3.A260/A280和A260/A230
A260/A280是核酸纯度的指示值。纯净的RNA样品比值应当>2.0,纯净的DNA样品比值应当>1.8,在pH7-8.5下纯度好的DNA或RNAA260/A280的比值应该在2.0或2.5。若比值<1.8或者2.0,则说明受到了酚类物质或者蛋白质的影响。A230表明有一些如碳水化合物、盐(胍盐)等污染物存在于样品中。比较纯净的核酸A260/A230的比值一般>2.0。
4.A260nm
是核酸Z高吸收峰的吸收波长即,0.1-1.0为其Z佳测量值的范围,如果不包括在Z佳测量值的范围内,对样品进行稀释或浓缩,使其处于该范围内;如果吸光度<0.05,那么可能受到了样品内有悬浮物、移液不准确等操作因素的影响。由于样品中的杂质和颗粒一般会对光有一定的吸收,因此,想要吸光度值可靠,核酸的吸光度必须大于0.1。
5.A280nm,A270nm
A280nm是蛋白Z高吸收峰的吸收波长,核酸样品纯度能够通过比值进行评估,2.0为纯RNA的比值,1.8为纯DNA的A260/A280的比值。若比值偏低,说明受到蛋白(芳香族)或酚类物质的污染,需要对样品进行纯化。50%蛋白质/DNA溶液比值相当于1.5,270nm为酚的Z大吸收峰。
应用
记录仪(色谱工作站)、自动部分收集器、恒流泵、上层析柱等均配备于该仪器上,从而使得一套完整的液相色谱分离层析仪(系统)组合成功。
其在现代生物学研究、药物测定、农业科研、化工、食品受到广泛的应用,尤其是用于YL科研单位对具有紫外吸收的生物样品的定性、定量分析。其能够连续地对微量样品池进行检测,使得分离生物大分子的目的Z终达到。
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