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1982年,美国国立卫生院Ito博士研制开发了一种新型的、连续gao效的液液分配色谱技术--高速逆流色谱法,这种技术不同于其它色谱技术,任何固态载体其均不需要,所以可以使固相载体表面与样品发生反应而造成的样品污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响得以避免,同时其具备较高的回收率,低廉的价格,较大的进样量,较为广泛的适用范围以及快速等优点。所以其广泛应用于生物、医药、食品、材料、化妆品和环保等领域,其在天然产物活性成分的分离纯化领域特别受到重视。
前景
这些年以来,溶剂体系有了越来越宽泛的选择范围,一些人表示流动相可以使用超临界二氧化碳,对于化合物的分离而言,其扩散性高,粘度低,无论是流体特性还是环境均相对友好,其相较于其他溶剂,优势非常的明显,也有一些人表示流动相可以使用制冷剂。又有一些人提出在高速逆流色谱分离中使用三相溶剂体系,能够非常好的分离宽极性范围的样品。到目前为止,仅在分离标准品混合物时使用三相溶剂,还没有在分离具体天然产物时使用三相溶剂。可以想象,复杂天然产物以及药物的分离若得到进一步的发展,那么它的应用前景一定非常大。
现在Z先发展起来的制备色谱技术为pH区带逆流色谱,其可以使样品提高超过10倍的负载容量。就算物质的含量非常低,其也可以高度的浓缩。其是将保留剂和洗脱剂这一对试剂加入到固定相和流动相中。在管柱内保留样品中的各组分为保留剂的作用,当含有洗脱剂的流动相通过一定流速从固定相穿过,因为酸碱反应Z终达到平衡。溶质的出峰时间取决于溶质的分配系数与标度值的差异。按照不同组分的Pka以及不一样的疏水性来使分离实现。
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