特色方案｜桔梗中桔梗皂苷D的测定

桔梗中桔梗皂苷D的测定

SGLC特色方案

摘要

本文建立了桔梗中桔梗皂苷D的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18和ShimNex WR C18分析桔梗中桔梗皂苷D，结果显示，桔梗皂苷D峰形对称，理论塔板数大于3000，桔梗皂苷D与相邻杂质峰基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为桔梗中桔梗皂苷D的检测提供参考。

01

实验部分

1.1    实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01）

ShimNex WR C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-22）；

SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；

LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2    对照品溶液的制备

        取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得。

1.3    供试品溶液的制备

        取本品粉末（过二号筛）约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，称定重量，超声处理（功率250 W , 频率40 kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液25 mL，蒸干，残渣加水20 mL，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨试液50 mL洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水50 mL洗涤，弃去水液，正丁醇液回收溶剂至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

02

分析条件与实验结果

1.4    分析条件

柱温：30℃

检测器：ELSD-LTⅢ蒸发光散射检测仪

漂移管温度：60℃

流速：1.0 mL/min

进样量：10 µL

流动相：乙腈：水 =25：75

1.5    实验结果

1.5.1 色谱柱：ShimNex WR C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-22）

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：

对照品溶液

供试品溶液

重现性

对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

1.5.2 色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01）

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：

对照品溶液

供试品溶液

重现性

对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

03

结论

本文建立了桔梗中桔梗皂苷D的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18和ShimNex WR C18分析桔梗中桔梗皂苷D，结果显示，桔梗皂苷D峰形对称，理论塔板数大于3000，桔梗皂苷D与相邻杂质峰基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为桔梗中桔梗皂苷D的检测提供参考。