2020药典｜枸橼酸离子含量测定

2020药典

枸橼酸离子含量测定

本文建立了人凝血酶原复合物中枸橼酸离子含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》第三部方法，并对色谱条件进行优化， 采用色谱柱 Shim-pack Scepter C18-120 分析枸橼酸离子， 枸橼酸离子峰形良好，拖尾因子小于药典要求的 1.4，满足《中国药典》 需求。此方法可为枸橼酸离子含量测定提供参考。

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实验部分

1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D 高效液相色谱仪；

色谱柱： 

Shim-pack Scepter C18-120（5 μm，4.6×250mm；P/N:227-31020-06）；

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+60L 水箱+取水器）；

SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N：380-00341-05）；

LC-MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（ P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet 移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（ P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（ P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（ P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

精密量取枸橼酸适量，用超纯水溶解并稀释，配制成浓度为 5 mmol/L 的溶液，作为对照品溶液。

1.3 供试品溶液的制备

取 1 mL 人凝血酶原复合物，加 4 mL 1.5%磺基水杨酸溶液，混匀，室温放置 2 h 以上， 3000 r/min 离心 10 分钟，取上清液，作为供试品溶液。

1.4 分析条件

色谱柱：

Shim-pack Scepter C18-120（ 5μm， 4.6×250 mm；P/N：227-31020-06）

柱温：40℃

检测波长：210 nm

流速：1 mL/min

进样量：20 µL

流动相：[18.2 mmol/L 磷酸二氢钠溶液， 0.1%异丙醇溶液（用磷酸调 pH 至 2.0） ]：乙腈= 97：3

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实验结果

按照上述色谱条件（ 1.4）进行采集， 对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：