荧光团和光学滤光片以进行荧光显微

荧光团是一种荧光染料，可作为蛋白质、组织和细胞标记的荧光标记物，以供荧光显微镜进行检测。荧光团的运作方式是吸收特定波长区域（又称为激发能量范围）的能量，然后在其他特定波长区域（又称为发射能量范围）内重新发射该能量。

图1：常见荧光团光谱曲线

一般来说，荧光团会被高频率的照明（紫外、紫色或蓝色光谱区域内的波长）激发或吸收能量，然后会在频率较低的照明（绿色、红色或近红外光谱区域内的波长）中发射该能量。每种荧光团都具备了能够GX吸收能量的波长，又称为峰值激发波长λ(nm)，以及能够将所吸收到的Z多能量重新发射的对应波长，又称为峰值发射波长λ(nm)（详情请参阅交互式滤光片图表）。选择单独光学滤光片以及Zda透射的波长将能够确保您获得清晰度Zgao的荧光图像。

在荧光显微镜应用中，典型的荧光显微镜设置包含了三个滤光片。有关典型荧光显微镜设置，请参阅图2。

滤光片一：激发滤光片

激发滤光片是放置于荧光显微镜的照明路径内。其目的是用于过滤光源中的所有波长，除了受检测荧光团的激发能量范围。滤光片的Z小透射(%)是决定图像亮度和清晰度的关键。对于任何激发滤光片，爱特蒙特光学建议使用的Z小透射为40%，Z理想的透射为>85%。激发滤光片的带宽应完全出现在荧光团的激发能量范围内，而Z理想的滤光片的ZX波长(CWL)应尽可能与受检测的荧光团的峰值激发波长的长度相近。由于光密度(OD)是决定滤光片如何截止带宽中波长的衡量标准，因此激发滤光片的光密度是图像背景暗度的关键。爱特蒙特光学建议使用的Z小光密度为3.0，Z理想的光密度为6.0。具备Z理想的ZX波长、Z小透射(%)以及光密度的光学滤光片能够提供清晰度Zgao的图像，而滤光片的Z深截止则能够确保检测到Z微弱的发射信号。

图2：典型荧光显微镜设置

滤光片二：发射滤光片

发射滤光片是放置于荧光显微镜的成像路径内。其目的是用于过滤受检测荧光团的整个激发能量范围，以及透射该荧光团的发射能量范围。对于发射滤光片，我们所建议的Z小透射、带宽、光密度以及ZX波长均与激发滤光片相同。同样的，具备Z理想的ZX波长、Z小透射(%)以及光密度的发射滤光片能够提供清晰度Zgao的图像，而滤光片的Z深截止则能够确保检测到Z微弱的发射信号。

滤光片三：二向色性滤光片或分光器

二向色性滤光片或分光器是以45°角放置于激发滤光片与发射滤光片之间。其目的是用于将激发信号反射至受检测的荧光团，然后将发射信号透射至检测设备。Z理想的二向色性滤光片或分光器应能够在Zda反射率和Zda透射率之间迅速过渡，激发滤光片带宽的Z理想反射率为>95%，而发射滤光片带宽的Z理想透射率为>90%。选择滤光片时，应该将荧光团的相交波长(λ)考虑在内，以确保获得Zdi杂散光和Zgao信噪比的荧光图像。若您在选择合适的二向色性滤光片或分光器上拿不定主意，爱特蒙特光学可以协助您选择一个Z适用于您应用程序的光学滤光片。立即联系我们，与我们讨论您的光学滤光片需求。

爱特蒙特光学如何将滤光片与荧光团相匹配？

爱特蒙特光学提供的一系列光学滤光片为现货供应且可随时出货，可满足每个特定荧光团的激发能量范围或发射能量范围。因此，您可以根据荧光团轻松快速地搜索Z合适的滤光片。只需浏览与峰值激发波长或峰值发射波长以及Zda透射波长Z相匹配的滤光片，即可搜索到Z合适的滤光片。对于使用多个荧光团、激光源、二向色性滤光片或分光器的荧光显微镜，或是使用比典型荧光显微镜设置更复杂的应用，请立即联系我们，与我们讨论您的规格需求。

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