- 探梦宇宙,阿美特克新一代【航天器太阳能阵列模拟器】隆重发布
- 探梦宇宙,阿美特克新一代【航天器太阳能阵列模拟器】隆重发布
- 梦想扬帆起,辉煌共铸成!加入 HORIBA 探索美好未来
- 再担重任,不负使命!HORIBA 加入小行星“贝努”样本分析团队
- 量子计量创未来!中国计量院深圳创新院与HORIBA共筑计量新时代
- 赫西仪器开展劳动法培训讲座
- 千眼狼恭祝《第九届全国青年燃烧学术会议》顺利召开
- 持续改进-助力焕新 贝克曼库尔特生命科学整体解决方案
- 环博会人气爆棚 &产品引领潮流!!!Day2
- 冷热台在低温介电性能测试中的应用
- 二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)的质量控制与杂质研究进展(附CATO全套杂质对照品清单)
- 二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)的质量控制与杂质研究进展(附CATO全套杂质对照品清单)
- 二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)的质量控制与杂质研究进展(附CATO全套杂质对照品清单)
- 来源:内容来源于网络 浏览量:714次
- 【导读】细胞凋亡检测试剂盒使用步骤1.调整待测细胞的浓度为5×105-1×106个/ml。2.取1ml细胞,1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清。3.加入1ml预冷的PBS,轻轻震荡使...
细胞凋亡检测试剂盒使用步骤
1.调整待测细胞的浓度为5×105-1×106个/ml。2.取1ml细胞,1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清。3.加入1ml预冷的PBS,轻轻震荡使细胞悬浮,1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清(对于贴壁细胞,先用胰酶消化,再用PBS洗涤)。4.重复步骤3两次。5.将细胞重悬于200μlBindingBuffer。6.加入10μlAnnexinV-FITC和10μlPI,轻轻混匀,避光室温反应15分钟或4℃反应30分钟。7.加入300μlBindingBuffer,在1小时内用流式细胞仪检测。8.若用荧光显微镜检测,将细胞混合液离心,取细胞沉淀涂片,再进行观察。
细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡是为维持环境稳定,为更好的适应胜春环境而主动争取的一种死亡过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用,是一种字体损伤的现象。
细胞凋亡检测试剂盒原理
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。AnnexinV是一种分子量为35.8KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异结合。FITC-AnnexinV结合到凋亡细胞后,在蓝色光的激发下,发出绿色荧光,区分出凋亡细胞与正常细胞。碘化丙啶(Propidiumiodide,PI)是一种核酸染料,它不能穿透完整细胞膜,但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透,并使细胞核红染。将FITC-AnnexinV与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞区分开来。
使用细胞凋亡检测试剂盒的注意事项
为保证得到理想的实验结果在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项。1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。2.AnnexinV-FITC和Propidiumiodide是光敏物质,在保存与操作时请注意避光。3.Propidiumiodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用。4.在细胞洗涤的Z后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留影响实验结果。5.PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行AnnexinV-FITC染色,上机前5分钟再加入PI染色。6.整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。7.反应完毕后请尽快检测,因为细胞凋亡是一个动态的过程,反应1小时后荧光强度就开始衰变。8.成功的检测凋亡受以下几种因素的影响,如细胞类型、细胞膜上PS的密度、发生凋亡时PS翻转的比例、诱导细胞凋亡的方法、所用试剂、诱导凋亡的时间等,把这些影响因素进行优化对实验成功是非常必要的。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2004-09-16 09:23:04
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
- 随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
近红外荧光探针(IRB-NHS)检测试剂盒使用常见问题解答2004-07-12 15:05:27
近红外荧光探针(IRB-NHS)检测试剂盒使用常见问题解答
-
鸡传染性法氏囊病间接ELISA抗体检测试剂盒的研究2004-07-12 15:05:27
鸡传染性法氏囊病间接ELISA抗体检测试剂盒的研究
-
鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制及初步应用2004-07-12 15:05:27
鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制及初步应用
-
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1检测试剂盒
-
干扰素β(IFNβ)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
干扰素β(IFNβ)检测试剂盒
-
足突蛋白(PDCN)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
足突蛋白(PDCN)检测试剂盒
-
蛋白酶3(PR3)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
蛋白酶3(PR3)检测试剂盒
-
激活素AB(ACVAB)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
激活素AB(ACVAB)检测试剂盒
-
CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)检测试剂盒
-
脑型肌酸激酶(CKB)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
脑型肌酸激酶(CKB)检测试剂盒
细胞凋亡检测试剂盒的使用方式是什么?
-
您可能感兴趣
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi