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- 【导读】青海发光杆菌成活率,判断之形态学观察法:1、细胞内出现颗粒或空泡。2、细胞内如果出现颗粒物质,表明细胞处于非健康状态。3、同样,细胞内出现空泡也说明细胞处于非健康状态。细胞丧失双折...
青海发光杆菌成活率,判断之形态学观察法:
1、细胞内出现颗粒或空泡。
2、细胞内如果出现颗粒物质,表明细胞处于非健康状态。
3、同样,细胞内出现空泡也说明细胞处于非健康状态。
细胞丧失双折射性:
如果发生在单层细胞:一个具有双折射性的正常细胞逐步失去这一特征(相差显微镜下细胞边缘成晕环),则提示该细胞已经死亡,即Z终干枯死亡。
如果发生在悬浮细胞:正常悬浮细胞清晰透明,如胞内出现颗粒或变浑浊表明细胞受损,甚至死亡。
怎样去除死细胞?单层培养的细胞死亡后,一般会漂浮起来,因此不需要特殊处理。
而悬浮细胞或原代培养细胞则要通过密度离心(如Ficoll梯度)方法收集死细胞。
细胞成活率检测实验
即刻检测实验
染料柜染实验:原理萘黑、台盼蓝以及很多其他染料均不能透过活细胞。概要将细胞悬液与染料混匀,在低倍显微镜下检查。材料包括无菌材料,即细胞;生长液;0.25%胰酶;PBSA.非灭菌材料即:血细胞计数板;生存力染料;巴斯德吸管;显微镜;手执计数器。
操作步骤:
1、用胰蛋白酶消化或离心,重悬制备高深度的细胞悬液
2、取一块干净的血细胞计数板,将盖玻片固定在适当位置上。
3、将一<滴细胞悬液和一滴(台盼蓝)或四滴(萘黑)染料混匀/li>
4、加至血细胞计数板的计数室中。
5、静置1~2min(但不要放置很久,否则活细胞会受到损伤而吸收染料)。
6、将计数板置于显微镜下,用10倍物境找到计数网格。
7、青海发光杆菌计数细胞总及着色细胞的数目。
8、清洗血细胞计数板,放入盒内。
3.3'-二氨基联苯胺片剂100Tablets生物技术级DABSUBSTRATETABS5MG/240MG
3.3'-二氨基联苯胺片剂生物技术级3,3'-DIAMINOBENZIDINE(DAB)TABLETS
3.3'-二氨基联苯胺片剂50Tablets生物技术级DABSUBSTRATETABS5MG/240MG
2XYT培养基肉汤100G生物技术级2XYTMEDIUMBROTH
2XYT培养基肉汤500G生物技术级2XYTMEDIUMBROTH
20%葡萄糖无菌溶液100ML生物技术级GLUCOSE,20%STERILESOLUTION
56-81-520%甘油无菌溶液100ML生物技术级GLYCEROL,20%STERILESOLUTION
dGTP100mM溶液,pH7.040M生物技术级DGTP,100MMPH7.0*DRYICE*
8%GENE-PAGEPLUS,7M尿素500ML生物技术级GENEPAGEPLUS8%*CLDPAK*
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- 2004-09-17 09:23:05
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