Elisa试剂盒操作步骤及方法

上海基尔顿生物拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、全方位的服务平台，为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前，协助发表的SCI及国家核心期刊上的学术论文达两千余篇，涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。主要从事实验技术服务，细胞株，试剂盒等，其中elisa试剂盒包括鼠elisa试剂盒,人elisa试剂盒,植物elisa试剂盒等。主要产品有：ELISA试剂盒、生化试剂盒、免疫组化试剂盒、蛋白定量试剂盒、细胞株以及各种实验室耗材等。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

120pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

60pg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

30pg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

15pg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

7.5pg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

上海基尔顿生物作为酶联免疫金牌供应商，凭借精湛的技术，全方位的售前，售中，售后免费代测服务，共同铸就高品质的产品。多年专业酶免服务，质量保证，可免费提供代测服务。欢迎来电咨询订购。

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