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- 【导读】 一、目的与要求 油脂是食品加工中重要的原料和辅料,也是食品的重要组分和营养成分。必需脂肪酸是维持人体生理活动的必要条件,人体所必需的脂肪酸一般取自食品用油,即食用油脂。气...
一、目的与要求
油脂是食品加工中重要的原料和辅料,也是食品的重要组分和营养成分。必需脂肪酸是维持人体生理活动的必要条件,人体所必需的脂肪酸一般取自食品用油,即食用油脂。气相色谱法测定油脂脂肪酸组分是现在Z常用的方法,也是一些相关标准(如:GB/T17377)规定应用的检测方法。
甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法,也是常用的标准方法(GB/T17376-1998)。
本实验要求了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理,掌握样品的前处理方法,学习食用油脂中脂肪酸组分的色谱分析技术。
二、原理
本实验甲酯化方法采用国标--GB/T17376-1998,甘油酯皂化后,释出的脂肪酸在3氟化硼存在下进行酯化,萃取得到脂肪酸甲酯用于气象色谱分析。
样品中的脂肪酸(甘油酯)经过适当的前处理(甲酯化)后,进样,样品在汽化室被汽化,在一定的温度下,汽化的样品随载气通过色谱柱,由于样品中组分与固定相间相互用的强弱不同而被逐一分离,分离后的组分,到达检测器(detceter)时经检测口的相应处理(如FID的火焰离子化),产生可检测的信号。根据色谱峰的保留时间定性,归一法确定不同脂肪酸的百分含量。
三、仪器与试剂
(一)仪器-
1.气相色谱仪:,配氢火焰离子化检测器(FID)。
2.恒温水浴锅
3.移液管
4.胶头滴管
5.小圆底烧瓶
6.冷凝管
7.样品瓶
(二)试剂:.石油醚、已醚、氢氧化钾、甲醇均为AR级。
四、实验步骤
(一)样品预处理
酯化测定:
取0.2g油样于10ml容量瓶中,家5.0ml4:3石油醚-已醚,使其溶解,在加4.0ml0.5mol/L氢氧化钾-甲醇溶液,振摇1分钟,放置8min后加水1.0ml,静止20min使之分层,取上层液注入色谱仪,保留时间定性,面积归一化法定量。
测定:
(1)气相色谱条件
①色谱柱:石英弹性毛细管柱,0.32mm(内径)×30m,内膜厚度0.5um。
②程序升温:150℃保持3min,5℃/min升温至220℃,保持10min;进样口温度250℃;检测器温度300℃。
③气体流速:氮气:40mL/min,氢气:40mL/min,空气:450mL/min,分流比301。
④柱前压:25kpa
(2)色谱分析
自动进样,吸取0.4-1μL试样液注入气相色谱仪,记录色谱峰的保留时间和峰高。利用标准图谱确定每个色谱峰的性质(定性),利用软件自带的自动积分方法计算各脂肪酸组分的百分含量。
五、鉴别
1.测定常见植物油主要脂肪酸的构成比并查阅有关资料,经统计学处理,不同的植物油主要脂肪酸的组成大部分有相同之处,但是主要脂肪酸的含量是不相同的。根据脂肪酸组成与含量,即可鉴别油品种类。
2.气相色谱法测定脂肪酸,通常用硫酸-甲醇法,和AOAC-IUPAC标准法,我们采用了氢氧化钾-甲醇法,经试验3种方法测定结果差异无显著性。
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- 2004-10-19 09:23:07
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