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- 【导读】 离子色谱采用DNAPac PA100高效阴离子交换核酸分离柱,在梯度淋洗条件下可实现C、A、T、G四种脱氧核苷酸与常见4种主要杂质(怀疑为C、A、T、G四种核苷酸)的良好分离...
离子色谱采用DNAPac PA100GX阴离子交换核酸分离柱,在梯度淋洗条件下可实现C、A、T、G四种脱氧核苷酸与常见4种主要杂质(怀疑为C、A、T、G四种核苷酸)的良好分离,分离度可达到1.5以上,峰形对称度在0.83-1.15之间,而理论塔板数均能高于5000。此外,方法还具有常规柱无法比拟的优势,能同时分离小分子碱基,离子色谱单分子核苷酸还有聚核苷酸,参见谱图中3min以前的峰和16 min以后的出峰。离子色谱柱上得到的峰形相比传统液相柱得到的更为尖锐,因此灵敏度相对高,10 μL进样时即可达到0.5 mg/L以下的检出限。 离子色谱多点校正操作规程 1. 配置标准曲线:将各个标准样品按照浓度由低到高的顺序一次进 样,同时在各样品的“定量组份”中输入各组分的套峰时间、组 分名称及浓度,同时在“定量方法”中选择“标准样品(计算校 正因子)”,谱图出完后停止采集信号并保存。 2. 离子色谱检测样品:将样品依次进样,谱图出完后停止采集信号并保存。 (注:每更换一种样品,都需要用去离子水将进样口清洗三次) 3. 制作标准曲线:将标准曲线的谱图全部打开,然后按照一定次序分别单击各谱图的“定量结果”中的“当前表存档”并确定,就 将各谱图存档了,然后单击 “定量方法”中“工作曲线”里的 “计 算”按钮,则标准曲线计算成功,此时可以在“显示”中看各组 分的标准曲线。 4. 计算样品:将样品谱图打开,离子色谱在“定量方法”中选择“多点校正 (基于工作曲线)”,然后单击“工作曲线”中的“计算”按钮, 然后再单击工具栏中的“计算”按钮,此时“定量结果”中就会 显示样品中各组分的浓度。 5. 生成报告:样品计算完成后,单击工具栏中的“打印”按钮,就 会以写字板的形式生成报告,然后打印报告,检测完毕。 离子色谱的一体化、人性化设计让仪器使用起来更简单,增强人机互动,让使用者随时了解仪器的运行状态。离子色谱仪凝结了多位科研人员的智慧结晶我们将会继续努力,向着更专业化的道路迈进。 优化的检测系统功能齐全,可获得完全可靠的结果,根据用户需要,配置不同的检测系统,实现仪器多功能化。 离子色谱仪使用及维护 1、流动相瓶中滤头要注意始终处于液面以下,防止将溶液吸干。 2、启动泵前观察从流动相瓶到泵之间的管路中是否有气泡,如果有则应将其排除。 离子色谱排除方法如下:先将与泵相连的塑料流路接头拧下来,用洗耳球吸满去离子水,从与泵段相连的流路管中注入,将流路管中的气泡排除干净。然后再将流动相瓶(一般为去离子水瓶)抬高,再将流路接头与泵连接好。离子色谱启动泵,打开泵内排气阀选钮,将泵内气泡排除干净,一般观察为流出液比较均匀,再将泵排气阀拧紧。(注意:此项操作时,整个流路是与色谱柱断开的)
- 2004-07-05 09:14:02
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