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上海长方光学仪器有限公司

乳酸脱氢酶(LDH)测试盒现货

来源:内容来源于网络 浏览量:346次
【导读】乳酸脱氢酶(LDH)测试盒规格:50管/24样产品内容:提取液:30mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入1.3mL...

乳酸脱氢酶(LDH)测试盒

规格:50管/24样

产品内容:

提取液:30mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入1.3mL双蒸水充分溶解备用,配好后可分装成小管-20℃保存,可保存两周,禁止反复冻融;

试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体60mL×1瓶,4℃保存;

丙酮酸钠标准液:液体1mL×1支,4℃保存,2mmol/ml。

产品简介:

LDH(EC1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样品测定的准备:

细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆;8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。血清(浆)样品:直接检测。丙酮酸钠标准液:取100ml标准液,倍比稀释至1、0.5、0.25、0.125、0mmol/ml,用2、1、0.5、0.25、0.125、0mmol/ml标准液做标准曲线。

二、测定操作:

分光光度计预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。样本测定(在EP管中加入下列试剂)试剂名称(μL)

测定管

对照管

标准管

样本

50

50

-

标准液

-

-

50

试剂一

250

250

250

试剂二

50

-

-

蒸馏水

-

50

50

充分混匀,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴15min

试剂三

250

250

250

充分混匀,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴15min

试剂四

750

750

750

充分混匀,室温静置3min,450nm下测定吸光度,样品计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需要设一个对照管。

根据标准管测定值和浓度做标准曲线,y为标准品浓度,μmol/mL;x为对吸光度。

LDH活力单位计算:

1、计算样品丙酮酸的含量,即将ΔA(x)带入回归方程中,计算y值(μmol/mL)

2、血清(浆)LDH活力的计算

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。

LDH(U/mL)=y÷T×103=66.7×y

3、细胞、细菌和组织中LDH活力的计算

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。

LDH(U/mgprot)=y÷T÷Cpr×103=66.7×y÷Cpr

需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。

LDH(U/g鲜重)=y÷T÷W×103=666.7×y

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。

LDH(U/104cell)=y÷T÷500×103=0.133×y

T:反应时间,15min;Cpr:蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,0.1g;500:细胞或细菌总数,500万;103:1μmol/mL=103nmol/mL。

乳酸脱氢酶(LDH)测试盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日最新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。


乳酸脱氢酶(LDH)测试盒运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果最少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。


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2019-02-28 09:23:04
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