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问题
可能的原因
解决方法
1.非常弱的结果
(1)温育的时间或温度不够;
校正温育箱温度;校正定时钟准
(2)显色反应时间太短;
确定时;使用新鲜合格的蒸馏水;
(3)所用配制缓冲液的蒸馏水有问题;
按照说明书保存试剂盒和准确配
(4)加入抗体/酶的稀释液浓度太低;
制工作液;试剂室温平衡至少20
(5)酶标仪滤光片不正确;
分钟,确保所有试剂已平衡至室
(6)不正确的试剂储存方式;
温(约25℃);校正移液器,吸
(7)试剂盒没有充分平衡;
嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸
(8)移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂
水太多或内壁不清洁。
嘴内壁要清洁,Z好一次性使用。
2.标准曲线和测定的重复性差
这是典型的由测定操作引起的问题,包括
重复某一样品时,加样时间尽可
(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;
能与diyi次接近;重复测定标本,
(2)加样过快,孔间发生污染;
操作条件、人员等应尽可能与上
(3)加错样本;
次保持一致,以排除这些因素造
(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非
包被区;
成的不一致的可能性;样品稀释
(5)不同批号试剂盒中组分混用;
(6)温育时间、洗板、显色时间不一致;
前应充分混匀;尽可能使用同一
(7)孔内污染杂物;
移液器并装紧吸嘴。
(8)酶标仪滤光片不正确;
(9)试剂/样品没有混匀;
(10)血清标本未完全凝固即加入,
反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留
血细胞,易出现假阳性反应等。
3.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
请按说明书所示稀释倍数配制;
(2)洗板液配制中出现问题,
如量筒不干净,含酶YZ物(如叠
氮钠)等;
注意不要漏加;每次加液前均应
(3)添加的试剂错误或者被遗漏;
核对标签。
(4)试剂过期;
4.空白背景高
(1)洗板不干净;
浓缩洗液准确配制;50倍浓缩洗
(2)显色液变质;
涤液如有结晶则应让结晶于室温
(3)试剂过期;
全部溶解后再量取稀释;充分洗
(4)不正确的试剂稀释液,如加酶的
浓度过高;
涤,彻底拍干;加样或加酶拍板
(5)蒸馏水受酶等污染;
的滤纸应弃去不用,不要反复使
(6)试剂混用;
用,否则易造成污染;吸嘴尽可能一次性使用;使用新鲜蒸馏水;不同批号试剂勿混用;请按说明书所示稀释倍数配制;显色反应时间适当缩短。
(7)培养箱温度超过37℃或反应时
间过长。
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- 2005-02-28 09:23:04
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