miRNA Northern Blot实验技术应用-多功能混匀仪技术文章

MicroRNA ( miRNA）是真核生物中一类长度约为20-25 nt（核苷酸）的非编码单链RNA分子。它在生物进化过程中高度保守，约占整个基因组基因总数的2%。大量研究表明，miRNA在多种生物学过程中发挥着关键作用，包括细胞发育、分化、增殖和凋亡；功能研究证实，多种miRNA分子与肿瘤的发SF展有关，miRNA具有类似致癌基因或抑癌基因的作用。

*较早发现的两个miRNA，lin-4和let-7，被认为通过不完全互补与靶mRNA 3'结合。在编码区末端，以未知方式诱导蛋白质翻译YZ，从而YZ蛋白质合成并阻断mRNA翻译。也有miRNA可以与靶基因完全互补，从而YZ基因表达，提示miRNA可能含有与siRNA相似的作用方式。

随着miRNA研究的不断深入，各种研究方法层出不穷，包括miRNA芯片、Real time-PCR、Northern Blot、RNase保护实验等。等等。在这些方法中，最经典的方法是miRNA Northern Blot。 miRNA Northern Blot 具有结果直观可靠的优点。因此，很多SCI期刊要求miRNA的研究提供Northern Blot实验结果。

美国Signosis公司的miRNA Northern Blot检测试剂以其简单的实验程序受到研究人员的称赞，尤其是基于**技术miRNA Northern开发的高灵敏度Blot检测试剂，由于能够检测低丰度的miRNA，成为美国Signosis的明星产品。 .使用美国Signosis公司开发的miRNA Northern Blot试剂发表了多篇高水平的SCI文章。下面，我们将通过对其中几篇文献的分析，详细介绍美国Signosis miRNA Northern Blot检测试剂。

1、文档1：miR-23的作用关于氧化剂引起的人视网膜色素上皮细胞损伤

在本文中，作者使用miRNA Northern Blot 检测试剂，用于检测 miR-23a 在正常和 AMD 患病 RPE 细胞中的表达。如上图所示，实验结果有清晰的条带，可见miR-23a在不同样品中的表达不同。

2、文档2：microRNAs的功能分析人类肝癌干细胞

使用miRNA Northern Blot用检测试剂分析不同样品miR-181aandlet-7a 表达情况。从上图可以看出，两个miRNA的表达水平在正常HepG2细胞中表达水平非常低，但在N-LSC、HSC-SR、HSC-DF 按表达顺序上升。从图中可以看出，即使使用普通的miRNA Northern Blot检测试剂，也能清晰检测到低表达的miRNA.

3、文档三：< font >通过深度测序表征与应激相关的 microRNAsin Glycine max

文章使用的是Signosis高灵敏度miRNA Northern Blot检测试剂，检测不同样品中多种miRNA的表达，结果可以清晰地看到低丰度的miRNA条带。表达miRNA的条带也很漂亮。Signosis高灵敏度miRNA Northern Blot检测试剂可以清楚地区分miRNA表达的差异，尤其是检测灵敏度比普通的高1到2个数量级时。

从以上三篇文献中Northern Blot实验的结果来看，Signosis开发的常用且高灵敏度的miRNA Northern Blot检测试剂效果稳定。全套试剂包含实验的所有组成部分，客户只需要相应的仪器即可完成实验的所有步骤。在不影响高丰度miRNA检测的情况下，可以清晰检测到低丰度miRNA。

转自生命科学论坛