细胞分布不均及解决办法

问：我的细胞接种培养板，细胞总是聚集在周边部分，该如何处理啊？我看园子里有的战友的细胞却是聚集在中间，是不是板子的质量题目啊？
答：请问你的细胞是如何混匀的？是滴管奏乐还是振荡培养板？假如是后者，而且是转圈摇匀的话，很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分，导致细胞中间少，四周多！自己可是试试！
周边一般是相对会多一点，但是中间的数目也不会很少啊~~展板的时候我也没有特异往振荡培养板。
大概是板子的质量题目吧或者是不是展板时候的细胞密度太低了？我用的corning的板。
一个好办法：在你培养种板之前，把培养板放进培养箱里进行几个小时的饱和后再取出，种进细胞时气力要轻，可采取用滴头在培养板孔的侧面慢慢加进让细胞悬液流进板孔中，培养的细胞基本是均匀生长。记住千万不要用振荡器振荡，否则你的细胞就会想你说得那样聚积在一起。
我今天把培养板放进培养箱里几个小时，适当的把细胞密度加大了一下，另外多加了一点培养液，今晚看细胞展的挺好的。我以为有两种可能解决你题目的办法:1.加进前奏乐均匀;2.从多孔板侧边或底边缓慢加进。

问：我在做原代培养时也碰到过这种情况，我一直以为培养皿展胶不均匀会导致这种现象，由于混匀的血管段加进到培养皿中时，在相差显微镜下血管段均匀分布在培养皿中，24h后贴壁的血管段就是周边多，中间相对少些。下次我要试试hkqu战友的方法看能否改变这种现象。

答：这种现象很正常呀，不知你仔细观察过没有，孔直径愈小，这个现象越明显，我试过，24、96孔板这种现象不可避免，由于液体的附壁使得孔内培养液不是成一个液平面，而是周边高，就像凹镜一样，而使用这两种孔板由于需要加干预等原因而不能加足量培养液，使得细胞随培养液一起出现“边集”现象，假如为了使孔ZX也有均匀细胞而增加接种细胞数目的话，这要看你需要观察何种指标，假如是MTT，免疫组化的话会由于细胞成层而影响结果。

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