SuperQuickRT cDNAdiyi链合成试剂盒说明书

SuperQuickRTcDNAKit

（ForReal-timePCR）

SuperQuickRTcDNAdiyi链合成试剂盒

（ForReal-timePCR）

目录号：YJ2381

保存条件：-20℃。

规格说明

Cat.No.YJ2381BYJ2381

KitSize25100

SuperQuickRTMix12.5μl50μl

5×RTBuffer（ForReal-timePCR）55μl220μl

PrimerMix27.5μl110μl

dNTPMix(2.5mMEach)55μl220μl

RNase-FreeWater1ml1ml

本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途

产品简介

　　本产品是为Real-timeRT-PCR研发的快速逆转录试剂，其包含从RNA模板逆转录

成cDNAdiyi链所需的全部试剂，优化的反应体系为快速逆转录酶提供更可靠的反应条

件。SuperQuickRT逆转酶逆转录效率高，可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应，

15分钟即可完成荧光定量PCR模板cDNAdiyi链合成。另外，逆转录反应温度可以提

高到50oC，可通读GC含量高和二级结构复杂的RNA模板。

产品特点

1．快速：42oC，15min可完成cDNAdiyi链合成。

2．反转录效率高：反转录效率高于90%。

3．灵敏度高：pg级模板也可以得到高质量的cDNA。

4．通读复杂模板：GC含量高和二级结构复杂模板。

注意事项

1．在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议操作人

员带口罩和一次性手套并经常更换手套，使用专门的仪器和耗材。

2．逆转录体系配制在冰上进行操作，防止RNA发生降解。试剂盒的酶使用后尽快置于

-20oC保存，并尽量避免反复冻融。

3．PrimerMix是由Oligo(dT)和randomprimer配制而成，也可根据实验需要选用Oligo-dT

Primer或GeneSpecificPrimer。

4．反应体系可倍比放大，10μl反应体系可Zda使用1μg总RNA。

5．对于二级结构复杂的RNA模板，建议在操作步骤之前，将模板RNA在65℃孵育5min立刻置于冰上，短暂离心后进行下一步操作。

操作步骤

1．将模板RNA在冰上解冻；将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上，使用前将每种

溶液涡旋振荡混匀，并经短暂离心后使用。

2．根据以下表格配制反应体系，涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。

试剂10μl反应体系终浓度

dNTPMix(2.5mMEach)2μl500μMEach

PrimerMix1μl

1）

RNATemplateXμl10pg～1μg2）

5×RTBuffer（forReal-timePCR）2μl1×

SuperQuickRTMix0.5μl

RNase-FreeWaterupto10μl

注意：1）根据实验需要可使用Oligo-dTPrimer或GeneSpecificPrimer，建议10μl反应体系加入Oligo-dTPrimer25pmol，或GeneSpecificPrimer2.5pmol。

2）如果总RNA量大于1μg，请按比例扩大反应体系。

3．42℃孵育15分钟。

注意：对于二级结构复杂或GC含量高的模板，可以提高逆转录温度至50℃，增强逆转录效率。

4．85℃孵育5分钟，使逆转录酶失活。

5．短暂离心后置于冰上，再进行后续Real-timePCR检测，如果需要长时间保存，请

置于-20℃。

注意：进行Real-timePCR反应时，逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。

相关产品信息

目录号产品名称产品特点

YJ0580TRIzon总RNA提取试剂适用范围广的RNA提取试剂

YJ0581超纯RNA提取试剂盒兼具有适用范围广和纯度高特点的RNA提取试剂

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YJ0741SuperRTcDNAdiyi链合成试剂盒与RNA亲和力强，能够通读GC含

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YJ2569HiFiScriptcDNAdiyi链合成试剂盒GX获得cDNA产物逆转录（针对于荧光定量PCR）

SuperQuickRTcDNAdiyi链合成试剂盒(ForReal-timePCR)

YJ2381仅需15分钟，即可完成荧光定量PCR所需的cDNA

即用型逆转录mix，只需加入RNA和水

SuperQuickRTMasterMix

YJ2391即可反应。仅需15分钟，即可完成荧光(forReal-TimePCR)

定量PCR所需的cDNA

荧光定量PCRSYBRGreen法

YJ0957UltraSYBRMixture

特异性强、灵敏度低、扩增效率高

荧光定量PCRTaqman法

YJ0932GoldStarTaqmanMixture

特异性强、灵敏度低、扩增效率高

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