炭疽流式细胞分析技术

流式细胞术（flowcytometry，FCM）是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是：

①测量速度快，Z快可在1s内计测数万个细胞；

②可进行多参数测量，可以对同一个细胞做有关物理特性、化学特性的多参数测量，并具有明显的统计学意义；

③是一门综合性的高科技方法，它综合了激光技术、计算机技术、流体力学、细胞化学、图像技术等众多领域的知识和成果；

④既是细胞分析技术，又是精确的分选技术。FCM的数据显示方式包括单参数直方图（his-togram）、二维点图（dot-plot）、二维等高图（con-tour）、假三维图（pseudo3D）和列表模式1istmode）等。流式细胞仪分析技术是一种重要的免疫学技术平台，可以实现快速敏感地检测微生物。与传统免疫荧光和ELISA检测技术相比，它可以将散射信号（scattersignal）和荧光强度结合起来分析Z终结果，Stopa等用纯芽孢试验表明，与近缘菌株交Y-N．应的散射信号和荧光强度与同种反应的不同，这就增加了流式细胞仪分析技术的选择性和特异性，降低了假阳性率，这一结论有待检测现场标本验证。用流式细胞分析技术的另一优点就是可以进一步限制荧光强度在结果评价中的作用，我们可以限定一个区域内必须出现荧光才能判断为阳性，而不是单凭强度漂移来判定。但是，必须注意的是，当标本中含有大量待测细菌时（>107CFU／m1）会出现前带现象降低荧光强度。

用流式细胞仪分析细菌或芽孢前首先应确定待检对象是否有自发荧光，研究表明，Sterne株有白发荧光，而Ames株和Vollum株则没有自发荧光。还要测定荧光抗体结合物有无自发荧光。然后，就可以确定结合物对不同株的反应性略有差异。一般流式细胞分析技术能检测103个／m1以上的细菌或芽孢。所用时间不等。Stopa等发展了一种仅用5min检测炭疽芽孢杆菌芽孢的流式细胞分析技术，并且能区分芽孢的死活。Dang等研究了芽孢灭活方法对流式细胞仪检测的影响。结果表明，无论是用多抗，还是用单抗，检测的荧光都发生了漂移，但是单抗检测信号明显降低，相反，多抗检测信号大大增加。

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