- 公益 | 德国IKA 奖学金颁发仪式在武汉大学顺利举行
- 公益 | 德国IKA 奖学金进驻同济大学
- Lovibond MD600/MD610 多参数光度计
- 南京东存|以旧换新,助力科研 提效赋能
- 【诚寻】Tekmar吹扫捕集Atomx用户
- 邀请函 | 欧尔赛斯诚邀您参加2024年俄罗斯国际实验室仪器及设备展览会 Analitika EXPO
- 加强校企合作 储备人才力量 | 青岛理工大学师生来明华参观交流
- 加强校企合作 储备人才力量 | 青岛理工大学师生来明华参观交流
- 来源:内容来源于网络 浏览量:710次
- 【导读】一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知,抗...
一、免疫组化技术的基本原理
应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(diyi抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗原放大,由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒)。通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细胞或组织中的化学成分,在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。
二、免疫组织化学染色方法
1、按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。
2、按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法);与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。
3、按结合方式可分为抗原抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法和亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是Z常用的方法。
三、几种常用免疫组织化学方法的原理
1、免疫荧光方法
是Z早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用比较广。
2、免疫酶标方法
免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前Z常用的技术。
本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。
免疫酶标方法的发展非常迅速,已经衍生出了多种标记方法,且随着方法的不断改进和创新,其特异性和灵敏度都在不断提高,使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的当属PAP法、ABC法、SP法等。
3、免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒,且胶体金的电子密度高,所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色,因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。
四、免疫组化技术的优点
1、特异性强免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时才会出现交叉反应。
2、敏感性高在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。
3、定位准确、形态与功能相结合该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学研究的深入是十分有意义的。
elisa试剂盒,进口elisa试剂盒,国产elisa试剂盒,elisa试剂盒,明胶酶谱法试剂盒,白介素Elisa试剂盒,睾酮检测试剂盒,雌二醇检测试剂盒,进口elisa试剂盒-上海信帆生物科技有限公司
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2004-09-07 09:23:11
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
- 随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
聚乳酸制作的方法流程 聚乳酸 生产是以乳酸为原料,传统的乳酸发酵大多用淀粉质2004-07-23 16:27:07
聚乳酸制作的方法流程 聚乳酸生产是以乳酸为原料,传统的乳酸发酵大多用淀粉质原料,目前美、法、日等国
-
免疫分子生物技术制作步骤2007-04-27 11:58:14
免疫分子生物技术制作步骤? 免疫分子生物技术 简介:人体内的细胞遇抗原时, 会受刺激繁殖
-
第三方检测专用动力Y10沥青烟采样枪采样器使用方法和注意事项价格参数2004-07-06 08:51:51
概述第三方检测专用动力Y10沥青烟采样枪采样器使用方法和注意事项价格参数1.1该沥青烟取样管完全按照国家环境
-
霉菌培养箱使用方法和步骤2004-07-09 09:55:17
霉菌培养箱使用方法和步骤1、插上电源插座(电源应有良好接地),按下电源开关,显示屏亮,此时显示屏所显示的是
-
涂层测厚仪,油漆测厚仪测量方法和原理2004-07-09 09:55:17
涂层测厚仪测量方法和原理对材料表面保护、装饰形成的覆盖层,如涂层、镀层、敷层、贴层、化学生成膜等,在有关国家
-
恒温恒湿试验箱湿球纱布挂置方法和注意事项2004-07-09 09:55:20
影响恒温恒湿试验箱湿度试验中湿度检测准确性的一个重要原因是湿球纱布挂置的不规范。试验过程中也需要经常更换湿球
-
皮革材料做噴霜的方法和结果分析2004-07-09 09:55:20
皮革材料做噴霜的方法和结果分析试验目的:规定了皮革的喷霜的试验方法试验材料:皮革试验原理:将试样放到一定温度
-
生化培养箱的使用方法和注意事项2004-07-12 15:05:27
生化培养箱的使用方法和注意事项
-
淘沙金的方法和设备2004-07-12 15:05:28
淘沙金的方法和设备
-
KRACHT涡轮流量计安装方法和工作原理2004-07-16 10:28:51
KRACHT涡轮流量计安装方法和工作原理:为了确保KRACHT涡轮流量计的测量准确,必须正确地选择
上海信帆生物:免疫组化的方法和优点
-
您可能感兴趣
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi