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绒猴EBV转化的白细胞
- 品牌：北京北纳
- 货号：
- CAS编号：
- 产地：朝阳区
- 供应商报价： 面议
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北京北纳创联生物技术研究院
更新时间：2022-07-22 10:46:09 -
企业性质生产商
入驻年限第4年
营业执照已审核
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- 详细介绍
资源编号：BNCC338523
英文名： B95-8
类型： 贴壁生长
形态： CM2-1培养液中，贴壁，上皮样细胞，圆形，菱形
分离基物： 外周血淋巴细胞
提供形式： 复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。
安全等级： 1
培养方法
传代方法 将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约2min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养； 生长条件 37℃，5%CO2，CM2-1培养液。CM2-1培养液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培养液，含谷氨酰胺。 存储条件 冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。 B95-8 绒猴 EBV 转化的白细胞
贴壁，上皮样细胞
编号： 338523
产品形式： 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ；
安全等级： 一级，安全柜或超净台操作
培养：37℃，5%CO2 CM2-1 培养液
收货须知：收货当天发现异常，请在 24 小时内及时联系客服，逾期视为收货良好；冻存管形式，收货后及时置于-80℃冰箱保存，若 长时间不使用，应过夜转移至液氮保藏；T25 形式，收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h，然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存，复苏后传一代，即可正常使用。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务。
培养条件：37℃，5%CO2，CM2-1 培养液。CM2-1 培养液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640 培养液，含谷氨酰胺。
复苏步骤：
①新制 100mm 平皿 1 个，含 12mL 上述培养液；
②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏；
③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；
④放入（37℃，5%CO2）培养箱中，过夜换液，2-4 天长满。
传代/冻存：将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 6mL（/100mm 皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落 时，则吸除大部分胰酶，留约 0.5mL，移至培养箱消化，约 2min 取出。
①传代：用 12mL CM2-1 培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后 可分 3~6 皿培养；
②冻存：用 6mL 冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为 6 支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。
复苏质量记录：根据复苏要求，对以上细胞株进行复苏，记录结果如下：
项目 质量标准 复苏记录 复活性 12h 贴壁，70h 长满 80% 过夜 18h 观察贴壁，66h 密度达 80% 细胞形态 贴壁，上皮样细胞 CM2-1 培养液中，贴壁，上皮样细胞，圆形，菱形 附图 
结论 复活性好，且细胞形态无异常，合格 质检员/日期： 张鑫 2019.03.13 审核员签字：杨晴
