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活细胞骨架染料(LifeAct质粒)

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详细介绍

应用:

-细胞骨架结构

-无毒性actin可视化

-荧光染色

-细胞骨架动力学研究

-细胞生物进程中actin动力学研究

-活细胞成像和显微观察


技术特征:

适用于瞬转和稳转

高生物兼容性--活细胞无毒性


图3.jpg

LifeAct是一个来源于酵母菌蛋白的17个氨基酸组成的多肽,可以对活细胞或固定细胞的F-Actin染色。与GFP-actin和其他的actin绑定蛋白相比,LifeAct的最大优势在于无论体内还是体外都不影响actin动力、作为一个新型actin marker。


图4.jpg

ibidi活细胞骨架染料LifeAct质粒可以在多种细胞中瞬转或稳转。有两种不同的启动子用于不同的实验需求:CMV (cytomegalovirus) or CAG (modified chicken β-actin)。如果是常见的细胞系,CMV启动子是较好的选择,能高效表达LifeAct。如果是比较敏感的细胞比如神经元或者胚胎干细胞,则CAG启动子比较好。其来源不是病毒,不会受到细胞防御机制的影响。


Ibidi活细胞骨架染料LifeAct质粒转染细胞之后,通过荧光marker tagGFP2或TagRFP使F-actin可视化。质粒对于多种很多类型的易转染细胞是很好的选择。稳定转染的细胞系能维持actin的长时间染色。


LifeAct的原始文献:

Riedl J, et al. Lifeact a versatile marker for the visualization of F-actin. Nature Methods 5, 605-607 (2008)

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