高通量杂交瘤筛选系统

在克隆筛选中为了下游处理的顺利，选择高产杂交瘤细胞克隆用以更多的生产出抗体是非常重要的----所以又称为“高产者克隆筛查”。在培养基中隐藏的抗体可以通过荧光标记二抗结合方法变为可视，形成分布在细胞克隆中的荧光晕状物质。在杂交瘤细胞克隆群中生产出的抗体能够非常明显的被分辨出来（见下图） 。通过比较克隆细胞（在亮视野可视）与克隆细胞周围晕的尺寸大小（在荧光视野下）。可以计算出抗体产量的比例，就是我们常说的质量系数。在细胞培养板中具有最高质量系数的细胞克隆是最高的抗体生产者。通过这种方法扫描样本，甚至可以从一批培养板中找到数量不多的高产者。

图为观察高产杂交瘤细胞克隆：示意图为通过荧光标记二抗（绿黄色）来观察杂交瘤细胞克隆（浅蓝色）和抗体（深蓝色）（A-C）；显微镜观察（亮视野荧光信号的叠加图片）在荧光标记二抗孵化后杂交瘤细胞克隆（D-F）；从图中可以对比看出抗体产量的强度与克隆周围荧光晕面积内径大小的相关性：（A和D）是克隆没有产出抗体，（B和E）克隆生产出中等数量的抗体，（C和F）为高产抗体克隆=“高产者”。但克隆的大小都是相似的（见D-F中右下角放大亮视野图片）