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谁能告诉我蛋白纯化的用到的各种试剂的各种组分的作用?

15194976824Li    2011-10-11    蛋白质纯化系统    浏览 233 次

精彩问答
天天听音乐go 发布日期:2011-10-12
蛋白质的纯化有很多种方法。1、根据分子的大小不同分离蛋白质的方法 (1)透析 主要用于除去蛋白质样品中的小分子杂质等。该方法利用蛋白质的胶体性质,蛋白质分子不能通过半透膜,而有机小分子、无机离子等都能自由通过半透膜。常用的半透膜有羊皮纸、玻璃纸、肠衣及一些合成材料等。 (2)超滤 是一种膜过滤技术。超滤过程中使用到一种微孔滤膜称为超滤膜,是人工合成的具有一定机械强度的半透性的膜。超滤过程中,对样品溶液施加一定的压力,在压力作用下迫使小分子和水透过超滤膜,而蛋白质等大分子由于不能通过超滤膜而被阻挡在膜内。(3)凝胶过滤层析 (4)密度梯度离心 这是一种沉降平衡方法。在离心场中,溶质密度必须大于溶剂密度才能够发生沉降。蛋白质溶液在离心过程中,由于其密度大于水而发生沉降,并且沉降的速度与分子的大小和密度有关。

2、根据溶解度的不同分离蛋白质的方法 (1)盐析法 在盐析法中Z常用的中性盐是(NH4)2SO4,这是因为硫酸铵在水中的溶解度很大,能达到盐浓度(离子浓度)很大,盐析能力强。
(2)有机溶剂分级法 极性有机溶剂的存在会导致蛋白质发生沉淀。有机溶剂分级法选用的是能与水混溶的极性溶剂,常用的有甲醇、乙醇、丙酮等。

3、根据电荷的不用分离蛋白质的方法 (1)电泳法 根据支持物的不同,有纸电泳、薄膜电泳、凝胶电泳等。 (2)离子交换法
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