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液相色谱梯度洗脱的原理是什么?

摩羯之星    2018-04-04       浏览 2532 次

液相色谱梯度洗脱的原理是什么?


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杭州美卓生物科技有限公司 发布日期:2018-08-23 10:15:56
梯度洗脱装置分两种:
高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入
低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。
梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低Z小检测量和提高分离精度。
但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。
梯度洗脱时应注意:
1、注意各溶剂间的互溶性。
2、对溶剂的纯度要求更高(影响重现性)。
3、注意梯度变化时系统压力的变化,防止超出限度。
4、梯度结束后,用初始流动相冲洗,使柱子平衡一段时间(再生),使系统回复到初始状态。(梯度周期)
5、低压梯度要注意脱气,混合后容易产生气泡。
6、容易出现鬼峰,应作空白试验。
7、梯度选择时尽量几相之间相变化要小,否则不易平衡。
8、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器(如紫外吸收检测器或荧光检测器),而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器(如示差折光检测器)。
9、要注意水相中盐的浓度,防止在有机相提升过程中盐的析出。
河南中氟环保设备有限公司 发布日期:2018-06-19 11:37:55
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱.在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱.
梯度洗脱的原理:流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k,并使样品种的所有组分可在Z短时间内实现Z佳分离.
梯度洗脱特点:提高柱效,改善检测器的灵敏度.当样品中的一个峰的k值和Z后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好.梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果.梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B.
如:在60min内,流动相配比从甲醇:水=1:99到甲醇:水=100:0
咖啡茶 发布日期:2018-04-04 15:04:39
LC洗脱分离是分析物与色谱柱相互作用、分析物与流动性相互作用结果。梯度洗脱是流动相组分随时间变化。所以,与固定比例流动相相比,分析物出峰时间会有变化。比如一样品好几个分析物,A出峰3min,B出峰30min。一般后出的峰,柱效不高,而且这么一次分析时间太长。所以可以在A出峰后不久,改变流动相组成即梯度洗脱,让B更快流出来,从而缩短分析时间,改善B峰形和柱效。
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