采用紫外光谱法和荧光光谱进法行实验的步骤

一、 实验原理
1、 材料发光原理
光照射在某些物质上时，基态分子吸收光后跃迁为激发态，激发态分子在因转动，振动等损失一部分激发能量后，以无辐射跃迁下降到低振动能级，再从低振动能级下降到基态，过程中激发态分子将以光的形式释放出能量，该光称为荧光。
影响辐射跃迁过程的不仅是该过程的初态和末态的能级位置和性质，在激发过程中涉及的其他能级及有关的非辐射过程也常对辐射跃迁过程有不同程度的影响。
进行辐射跃迁过程的实体是发光ZX。若发光过程从吸收到发射光子都在一个ZX进行，该发光ZX称为分立发光ZX。若作为发光ZX的离子的外层电子受到晶体场的作用很强，以至在被激发后可以进入导带（空穴进入价带），被激发了的载流子重新复合而发光叫做复合发光。
半导体的发光主要是辐射复合发光，是光吸收的逆过程，因此通常与半导体的电子激发有关。这种激发是不稳定的，总要回到基态。同样半导体辐射复合发光何光跃迁也是相似的。
荧光分光是一种光致发光，利用氘灯的光作为激发，打在试样池上的试样上，然后用光电倍增管检测样品的荧光，在连接到计算机上进行分析处理。
2、 紫外—可见光分光原理
电子能级的能量差一般为1-20eV，相当紫外和可见光的能量。由于电子能级的跃迁而产生的光谱叫紫外-可见光谱。类似振动能级之间的跃迁产生的光谱叫红外光谱；转动能级之间的跃迁产生的光谱叫红外光谱。
电子光谱是指分子的外层电子或价电子的跃迁所产生的光谱。
物质分子对辐射的吸收，既和分子对这种频率辐射的吸收本领有关，有和分子同光子的碰撞几率有关。可推导出朗伯—比尔定律，即辐射吸收定律

A为吸光度， 代表不同物质分子对某种频率辐射的吸收本领，是波长的函数； 是不同物质的浓度，l是光在各向均匀的物质中的通过厚度。固定物质的浓度和吸收池厚度，以吸收度对辐射波长作图，得到物质的吸收光谱曲线。
二、 实验步骤
1、 荧光分光光度计
荧光分光的整个物理过程在主机内完成，计算机用以处理数据和控制主机。
开机程序：开疝灯电源→开主机电源→开计算机电源→测试
关机程序：关计算机电源→关主机电源→关疝灯电源
样品准备→光谱测定→光谱分析
2、 紫外-可见光分光光度计
开启分光光度计的电源，钨灯点燃，开启氘灯电源，经过6秒左右，氘灯点燃；开启计算机电源，自动进入操作系统，同时启用系统应用软件。
样品准备→光谱测定→光谱分析