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为什么用无水乙醇沉淀DNA?

1019399127    2019-08-14    核酸提取仪    浏览 1998 次

为什么用无水乙醇沉淀DNA?

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aaaduoduoaaa 发布日期:2019-08-14 14:14:43

答:实验中Z常用的沉淀DNA的方法为使用无水乙醇来对DNA进行沉淀。能够和水以任意比相混溶相混溶是乙醇的优点,与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,所以其是理想的沉淀剂。DNA以水合状态稳定存在即是DNA溶液,当将乙醇加入时,DNA周围的水分子会被乙醇夺去,导致DNA失水而使聚合变得容易。通常实验中,是将2倍体积的无水乙醇加入与DNA相混合,乙醇含量的Z终占比大约为67%。由于和95%乙醇相比较,无水乙醇的价格要昂贵的多,然而加95%的乙醇会增大总体积,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,所以也增加了DNA损失,特别多次使用乙醇沉淀时,就会对收得率产生影响。Z后的沉淀步骤要使用无水乙醇,初次沉淀DNA时使用95%乙醇为折中的做法。也能够用0.6倍体积的异丙醇对DNA选择性沉淀。通常在室温下放置15-30分钟就行。


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