国外某生物YL单位已有显微镜,希望看FITC PI荧光染色切片
流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI)
实验方法:
1.用6孔板培养细胞,待细胞生长达到60%-70%,吸出旧培养基,根据实验需求处理,继续培养。
2.根据实验处理时间,把细胞培养液吸出至一合适离心管内,PBS洗涤贴壁细胞一次,加入适量胰酶细胞消化液消化细胞。室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶细胞消化液。需避免胰酶的过度消化。(注意:悬浮细胞不需要胰酶消化,直接收集到离心管即可)
3.加入步骤(2)中收集的细胞培养液,稍混匀,转移到离心管内,1000g离心5min,弃上清,收集细胞,用PBS轻轻重悬细胞并计数。(注意:加入步骤2)中的细胞培养液一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清可以有效YZ或中和残留的胰酶;残留的胰酶会消化并降解后续加入的Annexin V-FITC导致染色失败。
解决方案:
明美外贸同事和客户沟通后推荐了明美荧光模块MF-B-LED,当时觉得长通的模块还是能看到PI,和技术等沟通评估后换成窄带,成功解决了这个问题;明美荧光模块可配蓝色、绿色、宝蓝、紫外等激发光组;可应用于呼吸道疾病、生殖道疾病、结核杆菌、自身免疫性疾病等领域荧光的检测。通过推拉滑块即可在明场或荧光的观察方式之间进行切换;不仅可以匹配明美显微镜使用,也可以匹配其他厂家显微镜,例如:奥林巴斯显微镜,尼康显微镜(以上显微镜,均采用无限远光学系统 );方便显微镜升级改造。良好的表现,贴切的价格,会让你惊叹!
(来源:http://www.mshot.com/kehuanli/20191203.html广州市明美光电技术有限公司)
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